棉酚对2型糖尿病大鼠糖、脂代谢和肝纤维化的影响及机制探讨-病理学与病理生理学专业毕业论文.docx

温州医学院硕士学位论文RIA 温州医学院硕士学位论文 RIA radio immunoassay 放射免疫法 dm deoxynucleoside ttiphosphate 脱氧三磷酸核苷 ddH20 deionized distilled water 双蒸水 PBS phophate buffered solution 磷酸缓冲液 HE hematoxylin-eosin 苏木素伊红 IHC immunohistochemistry 免疫组织化学法 LM light microscopy 光学显微镜 TEM transmission electron microscopy 透射电子显微镜 HA hyaluronic acid 透明质酸 AIT alaninc aminotransferase 丙氨酸氨基移换酶 门冬氨酸氨基移换 AST 酶 ALB albnmin 白蛋白 NF．r,B nuclear factor KappaB 核因子xB a．SMA a-smooth muscle actin d平滑肌肌动蛋白 TGFpI transforming growth factor 91 转化生长因子8l 温州医学院硕士学位论文实验一棉酚对2型糖尿病大鼠糖、脂代谢的影响及机制探讨 温州医学院硕士学位论文 实验一棉酚对2型糖尿病大鼠糖、脂代谢的影响及机制探讨 摘要 目的：观察棉酚对2型糖尿病大鼠血糖、血脂、血胰岛素水平的影响，探讨11 13 -HSDl、GR、PEPCK、G6Paes在2型糖尿病发病机制中的作用及棉酚降血糖、降血脂、 改善胰岛素抵抗的作用机制。 方法：雄性SD大鼠30只分成三组：正常对照组10只、2型糖尿病对照组10只、棉酚 干预组10只。后二组喂以高脂饲料(饲料组成：10．0％猪油，20．096蔗糖，2．5％胆固醇， 1．o％胆酸盐，66．5％常规饲料)一个月，诱发胰岛素抵抗。糖尿病组、棉酚干预组大鼠 在禁食12h后按30mg／kg腹腔注射链脲佐菌素(溶于0．1mmol／L枸椽酸缓冲液内，PH=4．O)， 注射后l周测空腹血糖，≥8mmol／L为模型成功。正常对照组腹腔注射等容积枸椽酸缓 冲液。此后，棉酚干预组按15mg．kg-Id1剂量棉酚灌胃4周，从第5周起，按15mg／kg剂量 棉酚每周给予维持剂量一次至第12周末。正常对照组与糖尿病对照组给予等容积的2％ 羧甲基纤维素灌胃，灌胃次数及时间同棉酚干预组。治疗结束，禁食12小时后处死大鼠， 观测以下指标：(1)生化检测血糖、Tc、TG、LDL—c、HDL-c、Na+、K冰平。(2)ELISA 法检测血皮质酮水平，放免法检测血胰岛素水平。(3)制作肝组织匀浆，提取总RNA，用 半定量RT—PCR方法观察大鼠肝脏11 B-HSDl、GR、PEPCK、G6Pase基因的表达。(4)免 疫组化方法测定11 B-HSDl、GR的蛋白表达水平。 结果： 1、血糖、血脂、血胰岛素、血皮质酮、Na、K+水平：糖尿病组血糖、血胰岛素、 血皮质酮、TC、TG显著升高(P0．01)，LDL—c升高(PO．05)，HDL—c下降(P0．05)。 经棉酚干预后，血糖、血胰岛素、血皮质酮水平较糖尿病组明显降低(P(0．01)，TC、TG、 LDL—c水平较糖尿病组降低(P(0．05)，HDL—c水平较糖尿病组有升高趋势，但无显著 性差异。正常组、糖尿病组、棉酚干预组三组Na+、K+水平无显著差异。 2、肝组织的11 p．HSDl、GR、PEPCK、G6Pase基因mRNA表达水平：糖尿病组 GRmRNA表达显著升高(P0．01)，11 B．HSDl基因mRNA表达无明显变化，PEPCK、 G6Pase基因mRNA表达有升高趋势。经棉酚干预后，GRmRNA表达降低(Po．05)，11 B．HSDl、PEPCK、G6Pase基因mRNA表达显著降低(Po．01)。 3、肝组织11 B．HSDI、GR蛋白表达：糖尿病组11 B．HSDI、GR蛋白表达明显增 强。经棉酚干预后，11 O．HSDl、GR蛋白表达明显减弱。 4 温州医学院硕士学位论文结论 温州医学院硕士学位论文 结论 1、棉酚可降低2型糖尿病大鼠的血糖和胰岛素水平，增加胰岛素敏感性，并能改 善2型糖尿病大鼠的脂代谢异常。 2、2型糖尿病大鼠肝脏内11 B．HSDI、GR、PEPCK、G6Pase表达升高，这可能 是2型糖尿病的发病机制之一。 3、棉酚可降低2型糖尿病大鼠肝脏GR、l 1 13-HSDl、PEPCK、G6Pase mRNA表达水 平，降低肝脏GR、11 6一HSDl蛋白表达水平，这可能是其降血糖、降血脂、改善胰岛素 抵抗的部分机制。 关键词 糖尿病，实验性；棉酚；肝脏；