绿原酸静脉给药动物体内的分析方法的建立及其临床前药代动力学研究-药物分析学专业毕业论文.docx

声 声 明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含 其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川大学或其他教育机 构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡 献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 本学位论文成果是本人在四JII大学读书期间在导师指导下取得的，论文成 果归四川大学所有，特此声明。 申请人：徨莨 指导教师： 擒士卒 f l 四川大学药学院药物分析学硕士学位论文 四川大学药学院药物分析学硕士学位论文 绿原酸静脉注射的动物体内分析方法及其药代动力学研究 绿原酸静脉注射的动物体内分析方法 及其药代动力学研究 导师： 徐小平副教授 硕士生： 任霞 摘 要 绿原酸(chlorogenic acid，CHA)又名咖啡鞣酸，化学名为3-0一咖啡酰 奎宁酸(3-0一caffeoylquinic acid)，是一种由咖啡酸(caffeic acid)和奎 尼酸(quinic acid)缩合而成的缩酚酸，广泛存在于许多植物中，是许多中 药材和中成药的主要有效成分之一。具有广泛的生物活性，如利胆、抗菌、抗 病毒、稳定血糖、增加白血球、止血、缩短血凝和出血时间以及增强免疫等多 种药用功能。绿原酸具有多种临床作用正不断受到人们的重视，成为国内外研 究的热点之一。 绿原酸单体工业生产的实现，为开发绿原酸创新药奠定了基础。本文旨在 建立绿原酸的体内分析方法，通过对绿原酸在动物体内的代谢动力学、组织分 布规律、排泄规律、蛋白结合率、代谢产物以及对药物代谢酶的影响等方面研 究，为绿原酸进一步的临床试验提供了研究依据。 本文采用反相高效液相色谱法为检测手段，建立了静脉注射不同剂量绿原 酸后，Beagle犬和大鼠血清、组织、尿和粪中绿原酸含量的测定方法。揭示了 绿原酸体内代谢类型、组织分布规律、排泄规律、与蛋白结合情况，初步反映 了绿原酸动物体内代谢状况和对药物代谢酶P450的影响情况。 检测方法的系统评价结果表明，绿原酸在血清、组织中和在排泄物中的标 准曲线分别为；Y=O．086X一0．0002和Y=0．0025X+7×10一；日内精密度分别为： 1．18％、1．05％；日间精密度分别为：2．40％、1．42％；方法回收率分别为：102．0％ 和100．7％；最低检测浓度均为：6．25ng／mL。 动力学研究结果表明： 四川大学药学院药物分析学硕士学位论文 四川大学药学院药物分析学硕士学位论文 绿原酸静脉注射的动物体内分析方法及其药代动力学研究 1．不同剂量静脉注射绿原酸Beagle犬血药浓度一时间变化趋势均呈二室 模型，消除半衰期(Tm#)为44．10min，表观分布容积(V。)为0．83L／kg，清 除率(CL)为0．006L／min／kg，浓度时间下的面积(AUoo咖)分别为875．59、 253i．6、9007．imin．mg／L。呈现线性动力学特征。 2．不同剂量静脉注射绿原酸大鼠血药浓度变化趋势均呈二室模型，平均 消除半衰期(Tl／2 B)为44．68 min，表观分布容积(Va)为1．47 L／kg，清除率 (cL)“分剥为0．014 L／min／kg，浓度时间下的面积(AUC0-v1 80)分别为347．3、 1149．9、4132．5 min．mg／L。呈现线性动力学特征。 3．不同剂量静脉注射绿原酸大鼠的组织分布药物主要分布于肾组织，其 次分布于肝、肺、心、肌肉、肠、胃和脂肪等组织，组织中药物含量较同时间 血清浓度低。其中30min后组织浓度最高，个别组织10rain较高，150min后逐 渐下降至低水平。 4．不同剂量静脉注射绿原酸Beagle犬的排泄实验表明绿原酸以原形形式 主要从尿液中排泄较多，从粪便排泄较少。尿和粪排泄分别占给药总量的 83．4％、94．5％和13．0％和2．847％、1．193％和1．527％。 5．不同剂量静脉注射后，绿原酸与Beagle犬血浆蛋白的结合率平均分别 为：25．6±2．52％、35．4±1．43％、38．8±0．72％：与大鼠血浆蛋白的结台率平 均分别为：42．4±1．66％、46．5±0．83％、43．7±0．73％。 6．Beagle犬静和大鼠静脉注射绿原酸体内代谢产物尿中比血中明显，但 总体含量较小，尚未鉴定出，研究尚在继续进行中。 7．大鼠静脉注射不同剂量绿原酸对体内代谢酶的影响试验表明在本试验 剂量下，绿原酸对大鼠肝微粒体蛋白及细胞色素P450无明显影响。 综上所述，本文建立的动物体内绿原酸测定方法在0．1～819．2卜g／mL浓度 范围内具有良好的线性关系，检测限、回收率、精密度均满足绿原酸动物体内 药代动力学研究的需要。绿原酸不同剂量