植物细胞培养及次生产物代谢生产.pptVIP

植物细胞培养具有周期长、细胞抗剪切能力弱、易团聚等特点。同时，植物细胞规模培养的目的是生产天然产物，所以，植物细胞培养反应器的设计不仅要考虑有利于细胞生长，还要考虑有利于产物的积累和分离。 总体上，适合植物细胞培养的反应器应具有适宜的氧传递、良好的流动性和较低的剪切力。 　机械搅拌式培养系统 　　机械搅拌式生物反应器通常是在微生物发酵罐的基础上改进设计的，根据植物细胞的特性，其设备要求在微生物发酵罐的基础上作如下改进：搅拌装置要减少剪切，一般改叶轮式为螺旋式；因为植物细胞生长周期长，需要随时补充水分和营养，因此必须设计加液装置；由于植物细胞的生理活动需要新鲜空气，且细胞代谢也可能产生有害气体，所以必须设计通气装置； 为便于取样观察，一般还设计有取样口。 生物反应器 Stirred Tank Bioreactors An external motor is used to agitate the growth medium with impellers. Sterile air or combinations of gases can be introduced (sparkling) 气压搅拌式培养系统 考虑到机械搅拌式反应器的剪切作用难以避免，同时搅拌器转动的中轴往往是容易使培养物污染的部位，因此，发展出空气提升式生物反应器，但其缺点是搅拌不均匀。 Bubble Column Bioreactor (Airlift Reactor) Introduction of sterile air or pure gases is used both for agitation and oxygenation Internal Loop Airlift Bioreactor Tube placed inside the reactor creates internal circulation loop External Loop Airlift Bioreactor Circulation through an external loop 　　旋转式培养系统 　　　一般用于产品中试或某些必需裂解细胞才能获得目的产物的培养，其优点是控制精确，处理灵活，缺点是培养体积较小。 ②固定化培养系统 这一技术的优点在于： 可以较容易地控制培养系统的理化环境，从而可以研究特定的代谢途径，并便于调节； 细胞位置的固定使其所处的环境类似于在植物体中所处的状态，相互间接触密切，可以形成一定的理化梯度，有利于次生产物的合成； 由于细胞固定在支持物上，培养基可以不断更换，可以从培养基中提取产物，免除了培养基中因含有过多的初生产物对细胞代谢的反馈抑制，也由于细胞留在反应器中，新的培养基可以再次利用这些细胞生产初生产物，从而节省了生产细胞所付出的时间和费用； 正是由于细胞固定在一定的介质中，并可以从培养基中不断提取产物，因此，它可以进行连续生产。 细胞固定化培养技术按照其支持物不同可以分为两大类： 包埋式固定化培养系统：支持物多采用琼脂、琼脂糖、藻酸盐、聚丙烯酰胺等； 附着式固定化培养系统：支持物采用尼龙网、聚氨酯泡沫、中空纤维等材料。 1、利用细胞培养生产有用物质的一般程序 （1）选材　应注意以下条件： 　①药效肯定； 　 ②对其有效成分有充分的了解； 　 ③有测定有效成分和药理的可靠方法； 　 ④市场短缺或价格昂贵；　 　 ⑤取有药效成分的部位，且该部位较 　易形成愈伤组织。 （四）、利用细胞培养生产有用物质 　（2）细胞株系建立 将诱导产生的愈伤组织进行分离，建立悬浮细胞繁殖体系（液体培养）。 在工厂化生产中，为了提高有用物质产品的产量和质量，对细胞培养的选择有两个基本要求： 　　　①有用物质的合成积累能力强 　　　②生长速度快 　　（3）大量培养 将选出的优良细胞株扩大繁殖后，可作为细胞工厂化培养的生产“种子”，进行大量培养。 　　（4）产品提取与纯化 从植物细胞培养物中提取和纯化有的产品。 2、提高有用物质生产效率的技术因素 　①筛选高产细胞系 从实验材料中筛选高产的细胞株系是提高生产率、降低生产成本的重要因素。特异的次生代谢产物往往是特异的器官中形成的。因此，用特异器官为材料，建立特异功能的细胞系，并从中反复多代培养选择有效的、高产的细胞株。 筛选出的高效、高产细胞株系，有的植物细胞系其高效、高产性能稳定多年，但有的植物细胞系不稳定，因此，还需要定期检测，更