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溶血三项实验报告(共7篇) 　　溶血实验1.浓度　　2.溶液配制　　D-PBS：Dulbecco’sPhosphateBufferedSaline　　3.方法　　⑴新鲜血液2ml至用抗凝剂肝素预处理的采血管中。⑵加入4mlD-PBS，10000g离心5min。　　⑶弃上清，补加D-PBS至10ml，混匀后10000g离心5min。　　⑷重复⑶4次，至上清澄清透明。⑸加入20mlD-PBS重悬红细胞。　　⑹将红细胞悬液与材料工作液混合。以加水作为阳性对照组，D-PBS为阴性对照组。　　⑺各组设4个平行，4h后，10016g离心5min，各取样品100ul至96孔板测定577nm吸光度，以655nm吸光度为参考。　　溶血率%=[(OD样品-OD阴性)/(OD阳性–OD阴性)]×100%　　取健康非吸烟男性志愿者静脉血3ml。取2ml血液，加入4mlPBS，　　涡旋混匀。4℃，10020g离心10min。小心移除上清，补加PBS至10ml，混匀后离心，PBS重复处理5次至上清澄清透明。最后将红细胞用PBS定容至20ml重悬混匀。用PBS配制三种HAP纳米粒子的梯度工作液：100μg/ml，50μg/ml，25μg/ml，μg/ml，μg/ml。用ml上述红细胞重悬液与ml纳米粒子工作液混合，得到纳米粒子的终浓度为80μg/ml，40μg/ml，20μg/ml，10μg/ml，5μg/ml。ml红细胞悬液与mlPBS混匀为阴性对照，ml红细胞悬液与ml无菌三次水混匀为阳性对照，各组设3个平行。涡旋混匀后，于37℃孵育3h，10020g离心10min，各样取100μl上清，于570nm处测吸光度值。溶血率计算方法如下：溶血率%=[(OD样品-OD阴性)/(OD阳性–OD阴性)]×100%。　　溶血实验　　1，准备2%红细胞　　保定兔子，自心脏抽取血液5ml，加入ml抗凝剂EDTA，用PBS洗涤、离心，除去表面的白细胞，至上清液不显红色，弃上清液后取1ml再加入50ml的PBS即得。　　2，准备材料　　将不同种类的材料用PBS溶液调整浓度为800，400，200，100，50和25ug/ml。金团簇的浓度为50，25，，，ug/ml。　　3，实验过程　　4，每次使用红细胞前，用PBS洗，直至上清液中无明显红色，吸取底物200ul,稀　　释至10ml使用　　将的材料与的2%的红细胞溶液混合，室温条件下静止3h，之后用10050r/min离心3min。取出100ul于96孔板上，用570nm的波长检测。分别以水和PBS作为阳性对照和阴性对照。每个样品2个平行。　　溶血率=/×100%。溶血率超过5%视为溶血。　　溶血性实验　　实验目的：通过本实验认识溶血现象，并掌握溶血性实验常规的体外试管法的基本操作　　实验原理：溶血是指红细胞破裂、溶解的一种现象。药物制剂引起的溶血反应包括免疫性溶血与非免疫性溶血。免疫性溶血是药物通过免疫反应产生抗体而引起的溶血，为II型和III型变态反应；非免疫性溶血包括药物为诱发因素导致的氧化性溶血和药物制剂引起的血液稳定性改变而出现的溶血和红细胞凝聚等。溶血实验室观察受试物是否会引起溶血和红细胞聚集等反应。　　有些药物由于含有溶血性成分或物理、化学、生物等方面的原因，在直接注射入血管后可产生溶血现象；有些药物注入血管后可产生血细胞凝聚，引起血液循环功能的障碍等。有些中草药含有皂苷等成分，具有溶血作用。凡是注射剂和可能引起免疫性溶血或非免疫性溶血的药物制剂，均应进行溶血性实验。实验方法　　1.2%红细胞悬液的制备取新鲜鼠血10~20ml，放入盛有玻璃珠的三角烧瓶　　中振摇10分钟，或用玻璃棒搅动血液，除去纤维蛋白质，使成脱纤血液。加入生理盐水100ml，摇匀，1000~1500r/min离心15分钟，除去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水按上述方法洗涤2~3次，至上清液不显红色为止。将所得红细胞用生理盐水配成2%的混悬液(红细胞2ml，加生理盐水至100ml)，供试验用。　　2.取10ml干净玻璃试管7支，编号，1至5号管为供试品，6号管为阴性对照　　管，7号管为阳性对照管(完全溶血对照)。按表1所示，依次加入2%红细胞悬液。0。9%氯化钠溶液或蒸馏水，混匀后，立即置(37±0。5)℃的恒温水浴中进行温育，观察并记录各管的溶血情况。开始每隔15分钟观察1次，1小时后，每隔1小时观察1次，一般观察3小时。　　表1溶血实验设计表　　表2溶血试验结果判断标准　　全溶血溶液澄明，红色，管底无红细胞残留　　部分溶血溶液澄明，，红色或棕色，底部有少量红细胞残留;镜检红细胞稀少或变形不溶血红细胞全部下沉，上清液体无色澄明;镜检红细胞不凝聚红细胞凝聚溶液中有棕红色或红