黄瓜枯萎病的生物防治分析-植物营养学专业毕业论文.docxVIP

目 -一E司 黄瓜是一种全球性的重要蔬菜作物。近年来，由于黄瓜栽培面积逐年扩大，加 之大规模的南菜 :11:运， f吏黄瓜成了可以周年供应的重要蔬菜，在菜篮子工程中占 重要地位。但是，随着黄瓜生产的规模化、基地化、专业化，以及相关的生态环境变 化，黄瓜生产上的病害问题显得十分突出，发生程度日趋严重，尤其是黄瓜枯萎病等 土传病害危害更大，严重影响了瓜类蔬菜作物的产量和品质 e 黄瓜枯萎病 (Cucumber Fusarium W?lt) 又称萎荡病、蔓 J 病，是一种世界性的 维管束病害。黄瓜枯萎病由尖子包镰刀菌 (Fusarium Qxysporum) 引起，是一类主要经 土壤传播的维管束病害，在我国瓜类种植区普遍发生，黯统计，每年黄瓜的发病率可 达 20% ，甚至高达80-90% ，导致了黄瓜的严重减产，目前，此病害已成为生产上制 约黄瓜产量和品质的重要因素之一。 迄今，尚无奇效的农药可以防治这类维管束病害.现有的黄瓜品种，仅少数品 种具有一定的抗、耐病能力〈如中农 5 号、津春 5 号等).即使栽培这些品种，病害 还是年年发生:尽管轮作的栽培方式可以降低枯萎病的发病程度，但不能从根本上解 决病害的发生:嫁接技术虽能有效地防除枯萎病，但是，在生产上难以大面积推广， 因此，通过寻求新型的防病、治病手段，达到有效地控制黄瓜枯萎病的危害，已成为 生产实践中迫切需要解决的课题。基于生物农药的高效、安全、环保等优点以及人们 对黄瓜这种可以生食蔬菜的绿色要求，采用生物农药防治黄瓜枯萎病已经成为人们关 注的焦点. 本研究针对囚， \1 地区的生态条件，以防治对黄瓜栽培品种危害最严重的枯萎病病 原菌为目的，广泛筛选强力抑制病原菌生长的细菌菌株，对菌株进行生物学特性、抗 生性、最佳发酵配方和大回防治试验:并从分子生物学的角度研究其防治机理.以期 为基因工程提供抗病基因资源，为防治黄瓜枯萎病生物农药的产业化以及绿色蔬菜的 产业化提供理论依据。 搞要 本研究针对枯萎病对西 J 11蔬菜的严寰危害情况，从黄瓜栽培种的被围土攘中分离、筛 选出大量对枯萎病病原葛有结抗作用的菌株。通过平板对待法检测，筛选出对病原菌具苟 强拮抗作用的蕾株，研究了离株豹抗咨谐、生理生化特性飞促生性以及最佳发酵条件等生 物学特性事确定了其在辙生物学上的分类地位，并应揭发酵产物进行了 aH碍防治黄瓜枯萎 瘸试验.进一步从菌株的发酵产物中分离、纯化到对枯萎病病原富有强烈抑制作用酌措抗 蛋白质，通过蛋白质栩序，测定了多肤的 N来端氨基酸序列。取得的主要结果如下: 1 从黄瓜根圈土壤中，共分离获得 100 多株对枯萎病病原菌有拮抗活性的缀茵茵株， 通过对峙法测定，筛选出了拮抗作用强、具代表性的 3 株细菌 A挝、 L37、Yll. 其在 PDA 平板上对黄瓜枯萎病病原酶的抑磁带宽度分别为 2 如黯E、10mm、8.5mm. 2 抗菌谱的测定结果表明. 3 株细菌对供试的 11 株植物病原真离均有结抗作用.其 中，对水稻纹枯病病原菌和小麦赤霉病病原菌具萄强烈拮抗效果，其抑离平费宽度均达到 10mm 以上。 3 通过菌株的生理生化指标的测定，结合离株的形态特征，确定了其微生物分类地 位.A54 为施化假单胞菌 Pseudomonas alutzeri; L37 为枯草芽抱杆菌 Bacillus subtilis: Y 11 为地衣芽袍杆菌 Bacillus licheniformis. 4 对 3 株拮抗菌的生物学特性研究的结果显示，其生长曲线符合细菌的典型生长特 性.其生长状态受到培养基种类、温度、酸碱度、供氧量等因素的影响，并与其拮抗活性 相关， 5 通过田间小区防效试验，测定了在黄瓜窗期和成株期，商株的不同施菌浓度、施 营商时闷对枯萎病的防治效果.结果表明，在接种病原菌后 3 天施菌和施菌浓度达到 l08cfufml 时，防治效果最好. A54 、L73、Y1l 的防效分别可达 52%、55.36伪、 48.24%. 看 对黄瓜葛窥促生性实验结果表碗. 3 株拮抗绍麓的发酵产物处理的植株在所泌定 的 3 项生理指标和 5 项形态指标上较对照均表现出显著的促生作用.其中，在用发酵产物 对胚粮处理试验中，株离、株子室、株鲜重促进效果明显，且不同的葛株处理的促生 1生存 在显著差异。 -2- 7 大部防效试验表明，生防商对黄瓜两大病警部籍霉病和白粉病均具有防治作用。 冥中， A54 对黄瓜霜霉病的效果较好，病情指数下降 12.3%; 而 L37 对黄瓜白粉病的效果 较好，病情指数下降了 20.8%0 8 运用疏酸锁沉淀发酵产物获得了具有对病原葛具有结抗特性的题蛋白，对结抗将 蛋白避行柱层析以及 SDS-PAG毡，结果显示拮