黄瓜花粉发育及受精过程中热伤害与热适应生理基础的研究-蔬菜学专业毕业论文.docxVIP

张玉华：黄瓜花粉发育及受精过程中热伤害与热适应生理基础的研究 张玉华：黄瓜花粉发育及受精过程中热伤害与热适应生理基础的研究 1 黄瓜花粉发育及受精过程中热伤害与热适应 生理基础的研究 摘 要 为探讨高温对黄瓜花粉发育及受精过程的影响，本文采用比较方法研究了高 温与常温下黄瓜耐热品种JY一4和热敏品种新泰密刺处于单核至双核花粉粒时期的 花药及新泰密刺授粉后柱头和子房中ca2+分布、ABA含量及蛋白质合成的情况； 同时研究了外源Ca2+及ABA处理对高温下黄瓜花药及授粉受精过程的影响，结 果如下： I经45。C处理1h后两品系花药胞内Ca2+水平均有所升高，其中新泰密刺上升较 JY一4快，但在温度恢复至28。C后其钙稳态的恢复较慢：45。C处理1h后两品系花 药内源ABA含量均显著提高，新泰密刺上升幅度比JY4大，且恢复至28 4C后 下降速度也较快；应用蛋白质双向电泳技术分析了热激前后可溶性蛋白质合成 的变化，高温处理未能造成此期黄瓜花药新蛋白质的合成，但蛋白 MW70KD(P15．7)、MW45．5KD(P15．6)的表达经热激后明显增加，且在JY一4中的 表达水平显著高于新泰密刺。上述结果表明，Ca2+和ABA均参与了黄瓜花药对 高温胁迫的反应调节；黄瓜单核至双核花粉粒时期花药中热激蛋白的合成至少 已被部分抑制，这可能是该阶段黄瓜花药对高温敏感的重要原因。 II 28。C下，黄瓜(新泰密刺)授粉后柱头中的Ca2+主要分布在细胞间隙中，经45 ℃处理后细胞间隙和胞内Ca2+水平均显著升高，胞内外ca2+浓度梯度逐步丧失； 45。C处理lh后新泰密刺柱头和子房中内源ABA含量显著提高；高温处理后新泰 密刺柱头和子房中产生了一些新的蛋白质，如柱头中的MW26．0KD(P15．4)、 MW90．0KD(P15．1)、MW54．0KD(P14．6)、MW41．0KD(P16．2)，子房中的 MW90．0KD(P15．2)、MW61．0KD(P巧．4)、MW48．0KD(P16．4)、MW40，5KD (PILl．9)：另有一些蛋白质与常温相比表达量明显增加，如柱头中的MW67．0KD (P15．8)、MW56．5KD(P15．8)，子房中的MW70．0KD(P15，7)、MW57．0KD(P15．7)。 上述结果表明，ca2+和ABA信号系统均参与了授粉后黄瓜雌性器官对高温胁迫 2 2 扬州大学硬士学位论文 的反应调节，最终可能导致基因表达发生变化。 III用1．5mmol L1的CaCl2和1．0i tool L-1的ABA喷施JY一4和新泰密刺单核至双核 花粉粒时期的花药后置于45。C和28。C下处理。外源ca2+能降低高温下黄瓜花药 的胞内ca“水平并提高花粉萌发率，而ABA的作用与此相反。外源ca2+和ABA 处理均能显著提高高温下黄瓜花药内源ABA的水平，并产生新的蛋白质，如喷 施外源ca2+后新泰密刺和JY_4花药中均新增了蛋白MW56．0KD(P15．1)，新泰 密刺花药中增加了MW92．5KD(P15．2)，JY．4花药中增加了MW58．0KD(P15．3) 和MW92．5(P15．5)：外源ABA处理后新泰密刺花药中新增MW46．0(P16．O)， JY一4花药中新增MW56．0KD(P15．1)。以上结果表明，高温下外源ca2+可影响 黄瓜花药内ABA信号系统，继而可能改变基因表达，并获得耐热性；外源ABA 亦能影响黄瓜花药内Ca2+信号系统。 Ⅳ用1．5mmol L-1的CaCl2和1．0i mol L-1的ABA喷施黄瓜雌花和雄花，正常授粉 后置于45。C和28|。C下处理，观测柱头和子房中Ca2+分布、ABA含量及蛋白质合 成变化情况。外源ca2+减少了高温下黄瓜柱头和花柱引导组织的胞外cd+内流， 而外源ABA的作用不明显。外源ca2十和ABA处理均显著降低高温下黄瓜柱头 和子房内源ABA的水平，同时产生新蛋白质。45。C下，喷施外源ca2+和ABA 后予房内均新增蛋白MW90．0KD(P15．1)；喷施外源ca2+后子房内新增 MW56．0KD(P15．0)、MW34．5KD(P16．O)，柱头内新增MW35．0KD(P16．1)、 MW56．0KD(P15．1)；喷施外源ABA后子房内增加MW65．0KD(P15．4)、 MW58．0KD(P15．4)，柱头内新增MW63．5KD(P15．7)。以上结果表明，高温下 外源ca2十和ABA均可影响黄瓜雌花内ca2+和ABA信号系统，继而可能导致基 因表达的变化。 关键词：高温；黄瓜；花药；柱头；子房；钙；ABA：蛋白质双向电泳 —————————』!i塑—塑垄塑垄直墨墨楚塾堡生垫堕量量垫堡堕生堡薹型塑堕塞 —————————』!i塑—塑