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2017-06-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2016.07040 /
Chin J Appl Environ Biol 2017 23 ( 3 ) : 0474 0481
应用与环境生物学报 , -
甘蔗乙醇脱氢酶基因的克隆与表达*
# # 1**
苏炜华 黄 宁 凌辉 刘峰 曾瑞金 苏亚春 吴期滨 高世武 阙友雄
福建农林大学农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室 福州 350002
Alcohol dehydrogenase ADH
摘 要 乙醇脱氢酶基因( , )在植物抵御涝害、冷害、干旱等逆境中起着重要作用. 基于前
Suppression subtractive hybridization SSH
期已构建的甘蔗受黑穗病菌胁迫后基因差异表达的抑制消减杂交( , )文库,
利用电子克隆和 RT-PCR技术,从甘蔗品种ROC22 中获得一条ADH 基因的cDNA全长序列,命名为Sugarcane Alcohol
Dehydrogenase ScADH GenBank KJ577593 ScADH 1 644 bp 1 140
( ; 登录号为 ). 生物信息学分析显示, 基因全长为 ,含有
bp 的开放阅读框,编码一个379个氨基酸的蛋白质. ScADH蛋白为稳定、亲水的酸性非分泌蛋白,定位于叶绿体基质
上. 蛋白二级结构元件多为无规则卷曲,具有典型的ADH蛋白结构域以及NAD和锌的结合位点. 实时荧光定量PCR
Real-time quantitative PCR
( )表达分析表明,该基因在甘蔗各组织中组成型表达,其中根中表达量最高,而叶中的表
SA MeJA ScADH 6 h 7.34
达量最低. 在 和 胁迫下, 基因的表达趋势为 “先扬后抑”,均在胁迫 达到最大值,分别为对照的
11.81 ABA 12 h 5.53
倍和 倍. 在 胁迫下,该基因均上调表达,在胁迫 达到最大值,为对照的 倍. 在黑穗病菌胁迫下,该基因
在感病品种ROC22中的表达受到抑制,而在抗病品种YC05-179
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