绵羔羊卵母细胞体外发育能力的研究-动物遗传育种与繁殖专业毕业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 Research on the developmental competence of lamb oocytes in vitro A Dissertation Submitted to Shihezi University In Partial Fulfillment of the Requirements For the Degree of Master of Agronomy By ZHANG LI (Animal reproduction and technical) Dissertation Supervisor: Prof. Huang Juncheng June, 2014 Shihezi Xinjiang China 石河 石河子大学学位论文独创性声明及使用授权声明 学位论文独创性声明 本人所呈交的学位论文是在我导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除 文中已经注明引用的内容外，本论文不包含其他个人已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究 做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确的说明并表示谢意。 研究生签名： 时间： 年 月 日 使用授权声明 本人完全了解石河子大学有关保留、使用学位论文的规定，学校有权保留学位论文并向国家主 管部门或指定机构送交论文的电子版和纸质版。有权将学位论文在学校图书馆保存并允许被查阅。 有权自行或许可他人将学位论文编入有关数据库提供检索服务。有权将学位论文的标题和摘要汇编 出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。 研究生签名： 时间： 年 月 日 导师签名： 时间： 年 月 日 目 录 摘 要 I AbstractII 常用缩略语中英文对照表 IV 第一部分 文献综述1 1 供体羔羊的选择2 1.1 羔羊年龄2 1.2 羔羊体重3 1.3 品种选择3 1.4 季节因素3 2 外源激素诱导羔羊的卵泡发育4 2.1 促性腺激素处理法4 2.2 孕酮+促性腺激素处理法 5 3 采集卵母细胞5 3.1 卵母细胞的采集方法5 3.2 卵母细胞的采集时间6 4 体外成熟研究进展6 HYPERLINK \l _TOC_250001 4.1 BCB 的研究进展 6 4.2 卵丘细胞对体外成熟及体外发育的影响7 4.3 卵泡大小对体外成熟及体外发育的影响7 HYPERLINK \l _TOC_250000 4.4 卵母细胞直径、胞内 GSH 与体外成熟关系的研究进展 7 4.5 减数分裂的研究进展8 5 体外受精及早期胚胎培养8 6 羔羊胚胎移植及妊娠9 7 研究目的及意义9 第二部分 实验研究10 第一章 卵泡直径对绵羊卵母细胞体外发育能力的影响10 1 材料与方法10 1.1 材料10 1.1.1 药品及试剂10 1.1.2 卵巢采集10 1.2 方法10 1.2.1 卵母细胞的体外成熟培养10 1.2.2 去除卵丘细胞 11 1.2.3 卵母细胞孤雌激活 11 1.2.4 囊胚 Hoechst 细胞染色 11 1.2.5 数据统计 11 2 结果与分析 11 2.1 不同卵泡直径的比例 11 2.2 卵泡直径对卵母细胞回收效果的影响 11 2.3 不同直径卵泡中卵母细胞直径的比较12 2.4 不同直径卵泡中卵母细胞 GSH 含量的比较 12 2.5 卵泡直径对卵母细胞体外培养的影响13 3 讨论13 3.1 卵泡直径对卵泡比例分布的影响14 3.2 卵泡直径对卵母细胞回收效果的影响14 3.3 卵泡直径与卵母细胞直径、GSH 含量及成熟度的相关性研究 14 3.4 卵泡直径对卵母细胞体外培养效果的影响15 第二章 BCB 染色液对绵羊不同直径卵泡卵母细胞的筛选作用 17 1 材料与方法17 1.1 材料17 1.1.1 药品及试剂17 1.1.2 卵巢采集17 1.2 方法17 1.2.1 BCB 染色液染色 17 1.2.2 卵母细胞的体外成熟培养17 1.2.3 去除卵丘细胞17 1.2.4 卵母细胞孤雌激活17 1.2.5 囊胚 Hoechst 细胞染色 18 1.2.6 数据统计18 2 结果与分析18 2.1 不同卵泡直径卵母细胞与 BCB 筛选之间的关系 18 2.2 不同直径卵泡中卵母细胞经 BCB 筛选后的体外培养效率 18 2.3 不同直径卵泡卵母细胞经 BCB 筛选后体外培养的囊胚总细胞数 19 3 讨论19 第三章 外源激素诱导羔羊卵泡发育的研究22 1 材料与方法22 1.1 材料22 1.1.1 羔羊的选择22 1.1.2 主要试剂22 1.2 方法22