马铃薯茎尖超低温保存耐性细胞学基础的研究-作物学专业毕业论文.docxVIP

Thesis for Master‘s Degree Fujian Agriculture and Forestry University Study on the Cytological Basis of the Tolerance of Potato Shoot Tips to Cryopreservation Discipline category: Agronomy Primary discipline: Crop Science Secondary discipline: Crop Genetics and Breeding Research field: Genetics, Breeding and Multipe Utilization of Grain Crops Postgraduate na me: Zhang Haijing Supervisor: Professor Zhou Yuanchang Professor Chen Xiaoling Submission time: April, 2015 独创性声明 本人声明，所呈交的学位(毕业)论文，是本人在指导教师的指导下独 立完成的研究成果，并且是自己撰写的。尽我所知，除了文中作了标注和 致谢中已作了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成 果。与我一同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表 示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。 学位(毕业)论文作者亲笔签名： 日期： 论文使用授权的说明 本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位(毕业)论文的规定，即学校 有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅; 学校可以公布论文的全部或部 分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。 保密，在 年后解密可适用本授权书。 □ 不保密，本论文属于不保密。 □ 学位(毕业)论文作者亲笔签名： 日期： 指导教师亲笔签名： 日期 目录 摘要 I Abstract III 引言 1 1 文献综述 2 1.1 植物种质资源离体保存的现状及意义 2 1.2 马铃薯种质资源保存的现状及意义 2 1.2.1 田间圃位保存 3 1.2.2 试管苗保存 3 1.2.3 超低温保存 4 1.3 植物种质资源超低温保存研究 4 1.3.1 超低温保存的理论基础5 1.3.2 植物超低温保存结果评价 7 1.3.3 植物超低温保存相关机理研究 8 1.4 国内外马铃薯种质资源超低温保存研究 10 1.4.1 国外马铃薯种质资源超低温保存研究10 1.4.2 我国马铃薯种质资源超低温保存研究14 1.5 本研究的目的和意义 15 2 材料与方法 16 2.1 实验材料 16 2.2 技术路线 16 2.3 实验方法 17 2.3.1 组培苗培养 17 2.3.2 超低温保存流程 17 2.3.3 TTC 活力染色 18 2.3.4 差示扫描量热仪分析19 2.3.5 超低温扫描电镜 20 2.3.6 数据分析21 3 结果分析 22 3.1 超低温保存关键步骤对马铃薯茎尖成活率的影响 22 3.2 TTC 染色结果分析 23 3.2.1 马铃薯茎尖 TTC 活力染色条件优化 23 3.2.2 马铃薯茎尖超低温保存过程 TTC 活力染色结果分析 24 3.3 小滴玻璃化法超低温保存过程中 DSC 热力学分析 27 3.3.1 茎尖含水量变化 27 3.3.2 茎尖热力学指标 28 3.4 马铃薯茎尖超低温保存 Cryo-SEM 显微观察 32 4 结论与讨论 35 4.1 小滴玻璃化法超低温保存关键步骤马铃薯茎尖存活模式35 4.2 小滴玻璃化法超低温保存流程中马铃薯茎尖的 DSC 热力学指标 37 4.3 小滴玻璃化法超低温保存流程中马铃薯茎尖结构 Cryo-SEM 观察 38 本研究的创新点及后续研究 39 参考文献40 附录 53 1 缩略词表 53 2 主要仪器设备 54 致谢 55 研究生期间发表论文 57 I I 摘要 马铃薯是世界上重要的粮食作物之一，种质资源的安全保存是马铃薯种质 利用、新基因挖掘、优异品种育种等产业发展的物质基础。已采用多种保存形式 进行马铃薯种质的保存，如田间圃位保存、试管苗保存、超低温保存等。超低温 保存是无性繁殖作物种质长期安全保存的重要方法，研发优化的玻璃化等超低温 保存技术已用于马铃薯超低温保存，但超低温保存机理研究较少。本研究以马铃 薯品种“呼自 81-213”、“Q 504”和“克新 4 号”试管苗茎尖为试验材料，采用 小滴玻璃化法超低温保存，通过对关键步骤茎尖恢复培养，分析超低温保