猕猴皮肤成纤维细胞与家兔去核卵母细胞构建异质重构胚的初步分析-实验动物学专业毕业论文.docxVIP

独创。狴声明秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是莸个人 独创。狴声明 秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是莸个人 在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽藐所知，除了文中特别加 以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果， 不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志 对本研究所馓的任何贡献均已在论文中作了明确的说田并表示了致谢。 申请学位论文与资科若育不实之处，本人承担一坍相关责任。 论文柞者签名：盛盏： 日期 ”口3．‘．s 保护知识产权声明 本^完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定，朋：研究生在枝玫读 学位翔阊论文工作的知识产权单位属第四军医大学。本人保证毕业离校后，发 表论文或使用论文工作威果时署名单位仍然为第四军医大学。学校肓较保留送 交论文的复印件，允许论文搜查阿和借闲；学校可以公布论文的全部或部分内 容(保密内容除外)，可以采用影印、 编印或其他复嗣手段保存论文。 论文作者签各：基缢导师签各 洳晡咝垡 英文缩略词对照表缩写英文全称 英文缩略词对照表 缩写英文全称 中文全称 CCB cytochalasin B 细胞松弛素B CHX cycloheximide 放线菌酮 DMSO d／methyl sulfoxide 二甲基亚砜 6-DMAP 6-dimethylaminopurine 6-二甲氨基嘌呤 ES embryonic stem cell 胚胎干细胞 ET embryo transfer 胚胎移植 FBS fetal bovine serllm 胎牛血清 FSH follicle-stimulating hormone 促卵泡激素 hCG human chorionic gonadotropin 人绒毛膜促性腺激素 hMG human menopausal gonadotrophin 人绝经期促性腺激素 ICM inner cell mass 内细胞团 IVF in vitro—fertilized 体外受精 IVM in vitro—matured 体外成熟 IP3 1,4，5-tfisphosphate 三磷酸肌醇 MII metaphase II 第二次成熟分裂中期 MPF Maturation promotion factor 促成熟因子 NEBD Nuclear envelope breakdown 核包膜破裂 OBS oestrus bovine sertlnl 发情牛血清 PCC premature chromosome condensation 早熟染色体浓缩 PGCs primordial germ cells 原始生殖细胞 PVA polyvinylalcohol 聚乙烯醇 PVP polyvinylpyrrolidone 聚乙烯吡咯烷酮 sntES somatic nuclear transferred embryonic体细胞核移植胚胎干 stem cell lines 缅刹素 “ 猕猴皮肤成纤维细胞与家免去核卵母细胞构建异质重构胚的初步研究 猕猴皮肤成纤维细胞与家免去核卵母细胞 构建异质重构胚的初步研究 硕士研究生：朱华萍 导 师：李六金教授 (第四军医大学实验动物研究中心710032) 摘 要 本研究旨在探讨猕猴皮肤成纤维细胞与家兔去核卵母细胞构建异质重 构胚的可能性及其体外发育的潜能。在实验中，建立起了猕猴皮肤成纤维细 胞系，并观察了细胞的生物学特性；采用超数排卵和重复手术方法，收集和 筛选出了足量、高质的家兔成熟卵母细胞；以猕猴皮肤成纤维细胞核为供体、 以家兔去核卯母细胞为受体进行异种体细胞核移植的初步尝试，获得了二者 异质重构胚，并探讨了各种因素对重构胚体外发育能力的影响。f基本内容及 结果如下： ＼＼ 1、猕猴皮肤成纤维细胞系的建立 L)从猕猴耳缘皮肤取材，12例原代培养成活率为91．67％。 2)采用常规组织块培养法，四种培养液中，DMEM、TCMl99、RPMIl640、 D～IEM+F12，成活皮块数率分别为：80％、53％、93％、13％。说明DMEM和RPMI 1640 培养液适合猕猴皮肤成纤维细胞体外培养，RP．vlI 1640培养中，细胞体外贴壁、 生长增殖均迅速。 3)接种密度在2×101—1×10。／CIIl2范围内细胞生长增殖快。 4)在RPYlll640中分别添加10％