黄芩水提液体外抗RSV实验研究-免疫学专业毕业论文.docxVIP

硕士学位论文 硕士学位论文 摘要 摘要 目的}探讨黄芩水提液在体外抗呼吸道合胞病毒(RsV)的作用及其 作用机制，为治疗呼吸道合胞病毒感染寻找新型药物。 方法：将中药黄芩加水熬制，采用负压抽滤后合并滤液，用减压蒸发 的方法将药液浓缩制成水提液。运用体外细胞培养技术，用目测法和 MTT法检测黄芩水提液对Hela细胞的毒性。以病毒唑为阳性对照， 对黄芩水提液进行体外抗呼吸道合胞病毒的药效学检测。用空斑减数 实验测得病毒唑和黄芩对呼吸道合胞病毒的半数有效剂量。用 kruskallallis法检测病毒唑和黄芩在不同浓度不同时间对呼吸道 合胞病毒的抑制作用、对呼吸道合胞病毒的穿入的抑制作用以及其对 呼吸道合胞病毒的直接抑制作用。实验数据均采用spss软件13．0进 行统计分析。 结果：目测法黄芩对Hela细胞的半数中毒浓度(CC∞)为16．26 mg／ml， MTT法黄芩的CC∞为16．32 mg／ml，黄芩对呼吸道合胞病毒的半数有 效剂量(EC的)为2．43mg／ml。目测法病毒唑对Hela细胞的半数中毒 浓度(CC∞)为0．42 mg／ml，MTT法病毒唑的CC50为0．44 rag／m1；病 毒唑对呼吸道合胞病毒的半数有效剂量(Ec∞)为35．66 11 g／ml。黄 芩和病毒唑对呼吸道合胞病毒的抑制作用存在明显的量效关系； 黄 芩与病毒唑对RSV吸附到Hela细胞上的过程和穿入细胞膜的过程均 有明显的抑制作用(PO．01)；在不同时间给药，对RSV抑制实验中 发现病毒唑在RSV感染后2，4，6，8小时后给药能抑制RSV(PO．01)， 而黄芩在RSV感染后2，4，6，8小时后给药不能抑制RSV(PO．05)； 病毒唑对RSV有直接抑制作用，黄芩不能直接抑制RSV。 结论彳1．黄芩水提液具有一定的抗RSV作用，且对其的抑制作用具 有量效关系。 2．黄芩水提液在RSV感染早期(2小时)给药能抑制RSV，但在 RSV感染中晚期(2小时)给药不能抑制RSV。 3．黄芩水提液抑制RSV对细胞的吸附，以及抑制RSV对细胞膜的 穿透。 关键词黄芩水提液；体外实验；Hela细胞；呼吸道合胞病毒(Rsv) 硕士学位论文 硕士学位论文 ABSTRACT ABSTRACT oBJECTIVE：In order to find the new drug for respiratory syncytial virus (RSV)infection treatment，we study effect and mechenism of anti．respiratory syncytial virus of the water extraction of Scutcllaria Baicalensis Georg． METHoDS：We decoct the Chinese medicine Scutcllaria Baicalensis Georgi by adding water，then drainaging and filtering it tinder the negative pressure before we collect the filtrate．Wb concentrate the medicial solution and make it into Scutcllaria Baicalensis Georgi water extractiong using the method of vacuum evaporation．The，cytotoxicity of Scutcllaria Baicalensis Georgi water extraction was tested by 3．(4，5-dimethylthiazole．2．Y1)2， 5-diphenyl tetrazolium bromide) MTT assay and visual assessment using the method of cell culture in vitro．Antivira!activit、r of the Scutcllaria Baicalensis Georgi water extraction Was tested by the method of cell culture using ribavirin as positive contr01．The median effective concentration(50％effective c