氯离子通道-3在内皮素-1对牛角膜内皮细胞影响中的作用-眼科学专业毕业论文.docxVIP

华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 博士研究生毕业论文 缩略语一览表 BCECS bovine corneal endothelium cells 牛角膜内皮细胞 CLC一3 chloride channel一3 氯离子通道一3 Icl、b1 volume activated chloride channel 容积调节性氯通道 ET-1 endothelin一1 内皮素一1 RhEGF recombinant human epidermal growth factor 重组人表皮生长因子 BFGF basic fibroblast growth factor 碱性成纤维细胞生长因子 NpPB 5-nitro一2一(3-phenylpropylamino)一benzoic acid 5-硝基-2． (3一苯丙胺)苯甲酸 AS．0DN antisense oligodeoxynucleotides 反义寡核瞢酸 S—ODN sense oligodeoxynucleotides 正义寡核苷酸 MS．ODN missense oligodeoxynucleotides 错义寡核苷酸 PCNA proliferating cell nuclear antigen 增殖细胞核抗原 NSE neuron—specific enolase 神经原特异性烯醇化酶 HTC fluorescein isothiacyanate 异硫氰酸荧光素 DAB dianainobenzidine 二氨基联苯胺 DMS0 dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 MMLV MoloneyMurineLeukemiaVirus 莫洛尼(氏)鼠白血病病毒 DNTP deoxy-ribonucleoside triphosphate 脱氧三磷酸核菅 ECL enhanced chemiluminescence 增强的化学发光 DEPC diethyl pyrocarbonate 二乙基焦磷酰胺 EDTA ethylenediamine tetraacetiC acid 乙二胺四乙酸 PMSF phenylmethyl sulfonylfluoride 苯甲基磺酰氟化物 MTT 3一(4，5一dimethyl一2一thiazolyl)一2，5一diphenyl tetrazolium bromide 四甲基偶氮唑盐 RT-PCR reverse transcriptase—polymerase chain reaction 逆转录聚合酶链反应 SDS．PAGE sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electropheresis 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 华中科技大学同济医学院 华中科技大学同济医学院 博士研究生毕业论文 氯离子通道．3在内皮素．1对牛角膜 内皮细胞影响中的作用 华中科技大学同济医学院附属同济医院眼科 博士研究生： 胡维琨 导 师：旺酉碉教授 张虹教授 中文摘要 目的探讨体外培养牛角膜内皮细胞的最佳方法，并研究内皮紊．1(ET-1)对 其增殖和移行的影响及氯离子通道．3(chloride channel 3，CLC一3)在其中的作用。 方法采用2种培养方法和4种培养基体外培养牛角膜内皮细胞。通过损伤 模型检测细胞移行。采用免疫组化染色法、MTT法和流式细胞仪检测PCNA表达、 细胞增殖和细胞周期变化。免疫荧光测定CLC．3蛋白的表达部位。应用逆转录聚 合酶链反应(RT-P