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脂质过氧化及抗氧化剂抗氧化活性的检测方法
摘要:越来越多的研究表明,很多疾病和衰老现象都与脂质过氧化有关。本文对近年来脂质过氧化与抗氧化剂抗氧化活性的检测方法作简单综述,包括气相色谱、液相色谱、质谱、化学发光法等,并对不同方法进行了综合比较与评价。各种检测技术的对象各有不同,而且各有优缺点。因此,要针对不同的实验目的及条件来选择不同的检测方法。
关键词:脂质过氧化;抗氧化剂;抗氧化活性;检测
Lipids peroxidation and the Detection Methods of Antioxidant activities of Antioxidants
Abstract
Lipid peroxidation has received considerable attention because of its possible contribution to the potential damage of biological systems. The study on the mechanism and the protection of lipid peroxidation are concerned to our living and health. Lipids peroxidation and the methods of determination of peroxidation and antioxidant activities in biological systems were reviewed, including Gas chromatography, Liquid Chromatography, MS, Chemiluminescence and so on. Different methods are compared comprehensively and evaluated. A variety of detection technologies have different target clientele, but also have their own advantages and disadvantages. Therefore, it is necessary for different experimental purposes and conditions to choose a different detection method.
Keyword: lipid peroxidation, antioxidant, antioxidant activity, detection
在生物体内,很多脂类含有高不饱和脂肪酸,特别在生物膜的磷脂中,高不饱和脂肪酸含量极高。由于不饱和脂肪酸双键电子云密度大,化学性质很不稳定,很容易受到过氧化作用的损伤,产生有细胞毒性的脂质过氧化物。这些化合物能破坏人体细胞正常的生理功能,促使人体衰老和诱发癌症。目前,国内外关于氧化应激、自由基损伤和生物抗氧化的研究主要集中在食品、化妆品、生理学、流行病学和医学等领域,从分子水平上研究其作用机理、基元反应和结构/活性关系的工作尚不多见,许多基础理论问题尚待解决。因此,脂质过氧化的检测方法在反应机理的研究中就显得尤为重要。
各种抗氧化物质抗氧化作用的强弱取决于其抗氧化的能力(或称抗氧化活性,Antioxidant Activity)。抗氧化能力的测定方法有许多种,有直接的,也有间接的,还有简便的总抗氧化能力(TAC)试剂盒等。这些方法都有一定的优缺点或局限性(或专用性),测定原理也各不相同。因此,为获得准确的评价结论,还需综合评估各种方法,以获得满意的结果[1]。
1 脂质过氧化反应的机理
脂质过氧化作用(Lipid Peroxidation)是自由基生物学的一个分支,是指脂类(RH)的多不饱和脂肪酸(PUFA)与自由基反应,形成中间体自由基,再与分子氧形成脂质过氧化自由基,引起酸败变形[2]。生物膜的脂质中含有较多的多烯不饱和脂肪酸,易发生脂质过氧化而损伤膜的功能与结构。正常生命过程产生的自由基是维持生命所必须,但若浓度过高则对机体有害。体内自由基的产生与清除处于动态平衡中,一旦平衡破坏就危害机体。环境中有多种因素促使自由基的产生,引起脂质过氧化,例如电离辐射、紫外线、臭氧、废气、杀虫剂、除草剂、光敏剂及金属离子等等[3]。
自由基是指一类可以独立存在的含有未配对电子的物质,包括分子、原子、原子团或离子。若这类物质含有不配对电子的含氧基团称为氧自由基(Oxyen Free Radicais, OFR),主要包括超氧阴离子自由基(O2-)、过氧化氢(H2O2)、羟自由基(H
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