AFP表达调控载体对肝癌模型的靶向治疗作用-四川动物.PDFVIP

四川动物２０１３年 第３２卷 第４期　　　　　　　　　　　　　　　　　ＳｉｃｈｕａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｏｏｌｏｇｙ　Ｖｏｌ３２　Ｎｏ４　２０１３ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－７０８３．２０１３．０４．０２６ ＡＦＰ表达调控载体对肝癌模型的靶向治疗作用 张焕铃，侯洁，王俊霞，尤红煜，郑龙，连伟光，刘树锋 （河北医科大学实验动物学部，河北省实验动物重点实验室，石家庄０５００１７） 　　摘要：目的　观察甲胎蛋白（ＡＦＰ）表达调控载体ｐＡＦＰＰ５３ＥＧＦＰ对ＡＦＰ表达阳性肝癌模型靶向治疗作用。方 法　以人肝癌ＨｅｐＧ２（ＡＦＰ阳性）、人肝癌ＳＭＭＣ７７２１（ＡＦＰ阴性）细胞于ＢＡＬＢ／ｃｎｕ裸小鼠右腋皮下荷瘤，１４ｄ成 瘤，免疫组化检测ＡＦＰ。将构建好的ｐＡＦＰＥＧＦＰ和ｐＡＦＰＰ５３ＥＧＦＰ重组质粒于肿瘤内注射，观察肿瘤体积变化， 通过免疫组化观察ｐ５３在ＨｅｐＧ２肿瘤中的特异性表达及对肿瘤细胞的杀伤作用。结果　荷ＨｅｐＧ２、ＳＭＭＣ７７２１细 ３ 胞株裸鼠１４ｄ皮下肿瘤生长良好，且肿瘤体积均为５００ｍｍ 左右，经ＨＥ染色证实造模成功。同时，ＡＦＰ免疫组化 结果显示接种ＨｅｐＧ２细胞的肿瘤组织ＡＦＰ表达阳性，ＳＭＭＣ７７２１细胞的肿瘤组织ＡＦＰ表达为阴性。经ｐＡＦＰＥＧＦＰ 和ｐＡＦＰＰ５３ＥＧＦＰ重组质粒治疗后，ｐ５３的免疫组化分析结果显示接种ＨｅｐＧ２细胞的裸鼠ｐＡＦＰＰ５３ＥＧＦＰ治疗组 ｐ５３表达量显著高于其他各组，可见明显细胞凋亡现象，且肿瘤体积较对照组减小。结论　含ＡＦＰ基因调控序列的 ｐＡＦＰＰ５３ＥＧＦＰ载体可专一性地作用于ＡＦＰ阳性肝癌细胞，引起肝癌细胞周期阻滞和凋亡。 关键词：ＡＦＰ启动子；表达调控；Ｐ５３；细胞周期阻滞；细胞凋亡 中图分类号：Ｑ９５３３；Ｒ７３５７　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１０００－７０８３（２０１３）０４－０６０５－０４ ＴａｒｇｅｔｅｄＴｈｅｒａｐｙｏｆＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎＶｅｃｔｏｒＣｏｎｔａｉｎｉｎｇＡＦＰＲｅｇｕｌａｔｉｏｎＳｅｑｕｅｎｃｅ ｉｎＨｅｐａｔｏｍａＭｏｄｅｌ  ＺＨＡＮＧＨｕａｎｌｉｎｇ，ＨＯＵＪｉｅ，ＷＡＮＧＪｕｎｘｉａ，ＹＯＵＨｏｎｇｙｕ，ＺＨＥＮＧＬｏｎｇ，ＬＩＡＮＷｅｉｇｕａｎｇ，ＬＩＵＳｈｕｆｅｎｇ （ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＨｅｂｅｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＨｅｂｅｉＫｅｙＬａｂｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｎｉｍａｌ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ０５００１７，Ｃｈｉｎａ） 　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｔａｒｇｅｔｅｄｔｈｅｒａｐｙｏｆｐＡＦＰＰ５３ＥＧＦＰｃｏｎｔａｉｎｉｎｇＡＦＰｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｉｎＡＦＰ ＋ － ｐｏｓｉｔｉｖｅｈｅｐａｔｏｍａｍｏｄｅｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ＨｅｐＧ２（ＡＦＰ ），ＳＭＭＣ７７２１（ＡＦＰ ）ｗｅｒｅｉｎｏｃｕｌａｔｅｉｎＢＡＬＢ／ｃｎｕｎｕｄｅｍｉｃｅｒｉｇｈｔ ａｘｉｌｌａｒｙｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ．ＡＦＰｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ．Ｔｕｍｏｒｗｏｕｌｄｂｅｆｏｒｍｅｄａｔ１４ｄ．ＴｈｅｐＡＦＰＥＧＦＰａｎｄ ｐＡＦＰＰ５３ＥＧＦＰｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｐｌａｓｍｉｄｗｅｒｅｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌｌｙｉｎｊｅｃｔｅｄａｎｄｔｈｅｔｕｍｏｒｖｏｌｕｍｅｗａｓｍｏｎｉｔｏｒｅｄ．Ｔｈｅｓｐｅｃｉｆｉｃｅｘ ｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｐ５３ａｎｄｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｔｏＨｅｐＧ２ｔｕｍｏｒｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｔｕｍｏｒ