高分辨率和低分辨率质谱与纳升级LC和微流LC平台相结合.pdf

[ 应用纪要 ] 高分辨率和低分辨率质谱与纳升级LC和微流LC平台相结合， 定量分析人血清中的肽生物标志物 Billy J. MolloyChris J. Hughes Johannes P.C. V issers和James I. Langridge 沃特世公司(英国威姆斯洛) 应用优势 简介 ■ 采用八个不同的LC-MS平台定量分析未分馏、 基于LC-MS的靶向方法被越来越多地应用于发现后蛋白质组学研究，其中，作 未除高丰度的胰蛋白酶酶解血清样品中的多 为转化研究的第一个阶段，验证研究尤其受重视1 。此类实验必须以高通量、高 种酶解肽段并进行比较 灵敏度、宽泛的线性动态范围和优异的选择性分析大规模的组学样品，因此技 ■ 灵敏度低至埃摩尔级别 术挑战性极高。基于多反应监测 (MRM)的方法具有证明生物标志物可接受性所 需分析性能的潜力。 ■ 通量更高，适用性更强，适用于转化研究中 的大规模组学研究 本应用纪要将串联四极杆质谱仪和飞行时间质谱仪与纳升级和微流 (ionKey)液 ■ 优异的线性动态范围和重现性 相色谱平台相结合，对经胰蛋白酶酶解的未分馏、未除高丰度的人血清样品中 的肽进行MRM的定量分析，并全面比较了不同的LC-MS配置。不同的LC和MS 平台相结合组成了八套不同的LC-MS配置。此外，我们还比较了这些平台的通 量、灵敏度、线性和重现性，以证明它们在转化研究中用于分析大规模样品组 的适用性。 LC配置 MS配置/方法 肽/通道 1. 十五种 ‘ ’ 内源性肽 1. ionKey/MS 1. Xevo TQ-S micro 轻标 MRM 3个通道 2. Xevo TQ-S MRM 2. M-Class 沃特世解决方案 3. Xevo G2-XS QTof ToF-MRM (w/EDC) 2. 十五种 ‘ 重标’SIL Xevo® TQ-S, Xevo TQ-S micro,