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万方数据
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目 录
中文摘要………………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………………3 缩写词表………………………………………………………………………………5 引 言………………………………………………………………………………6 一、研究背景…………………………………………………………………………6
二、本论文的思路、目的和意义 ……………………………………………………8 材料和方法 …………………………………………………………………………9
一、材 料……………………………………………………………………………9
1、实验动物…………………………………………………………………………9
2、主要仪器…………………………………………………………………………9
3、细胞株来源………………………………………………………………………10
4、主要试剂…………………………………………………………………………10
5、常用溶液及培养基配制…………………………………………………………11 二、方 法……………………………………………………………………………11 1、细胞培养…………………………………………………………………………11
2、动物实验…………………………………………………………………………13
3、HE 染色…………………………………………………………………………14
4、蛋白芯片检测组织标本的蛋白表达……………………………………………14
5、Western blot………………………………………………………………………17
6、瘤球形成实验……………………………………………………………………19
7、流式细胞术………………………………………………………………………19
8、统计学处理………………………………………………………………………20 结 果……………………………………………………………………………21 一、裸鼠体内化疗最适剂量的确定…………………………………………………21 二、裸鼠体内化疗富集胃癌干细胞…………………………………………………22 三、高通量蛋白芯片检测获得差异表达的候选蛋白………………………………24 四、Western blot 验证蛋白芯片结果………………………………………………38 五、无血清瘤球培养富集胃癌干细胞………………………………………………39
III
六、流式细胞术分析贴壁细胞和瘤球中各细胞团的比例…………………………40
讨 论……………………………………………………………………………43 一、裸鼠体内化疗富集胃癌干细胞的可行性………………………………………43 二、蛋白芯片检测富集胃癌干细胞组织和未富集胃癌组织差异表达的意义……44 三、流式细胞术对贴壁细胞和瘤球中各细胞团比例分析…………………………45 结 论……………………………………………………………………………48 参考文献……………………………………………………………………………48 致 谢……………………………………………………………………………54 综 述……………………………………………………………………………55 附件一 ……………………………………………………………………………65
IV
CONTENTS
Abstract in Chinese…………………………………………………………………1 Abstract in Englis h…………………………………………………………………3 Abbreviations…………………………………………………………………………5 Pre face………………………………………………………………………………6 I. Research background………………………………………………………………6 II.The purpose, idea and significance of this paper……………………………………8 Material and Methods………………………………………………………………9 I. Material……………………………………………………………………………9 1. Experimental animal………………………………………………………………9
2. Main instrument……………………………………………………………………9
3. Cell lines…………………………………………………………………………10
4. Main reagents……………………………………………………………………10
5. Co
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