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蛋白质的变性实验报告 　　实验一蛋白质的沉淀及变性　　发布时间：XX-12-23浏览次数：850　　一、实验目的　　1．熟悉蛋白质的沉淀反应。　　2．进一步掌握蛋白质的有关性质。　　二、实验原理　　蛋白质因受某些物理或化学因素的影响，分子的空间构象被破坏，从而导致其理化性质发生改变并失去原有的生物学活性的现象称为蛋白质的变性作用。变性作用并不引起蛋白质一级结构的破坏，而是二级结构以上的高级结构的破坏，变性后的蛋白质称为变性蛋白。　　引起蛋白质变性的因素很多，物理因素有高温、紫外线、X-射线、超声波、高压、剧烈的搅拌、震荡等。化学因素有强酸、强碱、尿素、胍盐、去污剂、重金属盐三氯乙酸，浓乙醇等。不同蛋白质对各种因素的敏感程度不同。　　用大量中性盐使蛋白质从溶液中析出的过程称为蛋白质的盐析作用。蛋白质是亲水胶体，在高浓度的中性盐影响下脱去水化层，同时，蛋白质分子所带的电荷被中和，结果蛋白质的胶体稳定性遭到破坏而沉淀析出。经透析或用水稀释时又可溶解，故蛋白质的盐析作用是可逆过程。盐析不同的蛋白质所需中性盐浓度与蛋白质种类及pH有关。分子量大的蛋白质(如球蛋白)比分子量小的(如白蛋白)易于析出。改变盐浓度，使不同分子量的蛋白质分别析出。　　三、实验材料　　1．新鲜蛋清或血清，蛋白质溶液。　　2．固体硫酸铵及饱和硫酸铵溶液。　　3．95％乙醇，1％CuSO4，饱和苦味酸，/LHAC，NaCl,　　4．试管，三角漏斗、玻棒，滤纸，试管架酒精灯，移液管。　　四、操作方法　　1．卵清蛋白的分离2++2+　　(1)、取卵清约2ml于试管中，加等体积的饱和硫酸铵溶液，搅拌均匀，蛋白质析出，静置，用滤纸过滤致滤液澄清，沉淀为卵球蛋白，将此沉淀用2ml半饱和硫酸铵洗涤一次。　　(2)、将析出卵清球蛋白后的滤液放人试管中，再加人固体硫酸铵使之达饱和，观察有无沉淀产生，若有沉淀，则过滤之，滤出的沉淀却为卵清白蛋白。　　2．乙醇沉淀蛋白质。　　取蛋白质滤液1ml，加晶体NaCl少许。带溶解后再加入95％乙醇2ml混匀，观察有无沉淀析出。　　3．重金属盐沉淀蛋白质。蛋白质与重金属离子结合成不容性盐类而沉淀。取试管1支加蛋白质溶液2ml，滴加1％CuSO4溶液，至有沉淀生成。　　4．生物碱试剂沉淀蛋白质。植物体内具有显著生理作用的含氮碱性化合物称为生物碱。能沉淀生物碱或与其产生颜色反应的物质称为生物碱试剂，如苦味酸。生物碱试剂能和蛋白质结合生成沉淀，可能因蛋白质和生物碱含有相似的含氮基团。2ml蛋白质溶液及1％醋酸溶液4－5滴，加5％苦味酸数滴。　　蛋白质的盐析与变性　　1.盐析一般是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程。如：加浓2SO4使蛋白质凝聚的过程；在乙酸的酯化反应中加入饱和碳酸钠溶液，降低乙酸乙酯溶解度，使其分层现象更明显的过程。　　2.向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析，可复原。　　2.向某些蛋白质溶液中加入某些重金属盐，可以使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作变性，性质改变，无法复原。　　豆腐的原料黄豆富含蛋白质，蛋白质含量36%～40%，经水浸、磨浆、除渣、加热，得到的蛋白质的胶体(一种介于溶液和悬浊液、乳浊液之间的混合物)。点豆腐就是设法使蛋白质发生凝聚而与水分离。　　盐卤是结晶氯化镁［MgCl2·6H2O］的水溶液，属电解质溶液，可以中和胶体微粒表面吸附的离子的电荷，使蛋白质分子凝聚起来得到豆腐。　　既然点豆腐是让蛋白质发生凝聚，所采用的凝胶剂就不一定是非盐卤不可，其他如石膏、酯酸、柠檬酸等都有相同的作用，都可用来点豆腐。这里还有值得一提的是，近年来在市场上销售一种盒装豆腐，它洁白细腻，质量明显高于传统方法制做的豆腐，原来，它的凝固剂采用了一种新的化学物质——葡萄糖酸内酯，这也是新科技用于食品加工的一个例子。　　当加入大量盐类于蛋白质溶液中，由于高浓度盐离子的水合作用而破坏了蛋白质胶粒的水膜；并由于反离子对蛋白质胶粒双电层压缩的结果，使电荷中和而成沉淀析出，这种用盐使蛋白质从溶液中沉淀析出的过程，称为盐析．例如：用盐卤或石膏等盐类加入豆浆中使蛋白质沉淀而制取豆腐，即利用这个原理．　　这是典型的蛋白质盐析　　西华师范大学?　　第二十七届实习生课堂竞教比赛?　　教案　　参赛学科：　　选手姓名：　　蛋白质的变性?　　西华师范大学　　二0一四年十二月三十日　　参赛题目：?　　“蛋白质的变性”教案?　　一、教材分析　　人教版普通高中课程标准实验教科书化学第一章关注营养平衡，第三节生命的基础——蛋白质，此节内容分为三个课时，本节课为第二课时。　　蛋白质是生命中的基础有机化学物质之一，也是人