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观察菌落实验报告 　　检验报告　　实验名称：菌落总数的检验　　实验方法：平板计数法　　商品名称：夸夸唔、有友、奇爽、乐棒　　棒、香猪脆、香脆肚。　　参照标准：GB4789-17XX　　总负责人：熊经理　　检验人员:徐恒琴、崔艳霞、游惠　　检验时间：XX年7月26—8月　　号6　　XX年8月8日　　菌落总数的检测　　平板计数法　　一、实验目的　　为了进一步了解与熟悉我们产品的操作规范和关键点的控制，掌握菌落总数的检验方法和了解超净工作台的操作规范。　　二、实验仪器设备和所需试剂及试剂的配制。　　1、实验仪器及设备　　杀菌锅YXQ—LS—SU编号5090、无菌超净工作台SW—CJ—IC编号24、JJ-Z型组织捣碎机、隔水或智能恒温培养箱GHP—9080、出厂编号13475、烘箱ZFD—5040(全自动型鼓风干燥箱）、蒸馏水制备机、灭菌过的250ml锥形瓶、1ml吸量管、10ml的吸量管、酒精灯、锥形瓶1000ml、培养皿、电子天平AL104、电磁炉、锅、锅铲、PH试纸、恒温水浴锅HH—4出厂标号。　　2、试验试剂及配制　　主要试剂：琼脂、无菌生理盐水、无菌水、75%的酒精、1moL/L氢氧化钠、1moL/L的盐酸。　　药品试剂　　琼脂：准确称取胰蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖、琼脂、蒸馏水2500ml，加入至锅中煮沸溶解，先加入琼脂将其熬化，在加入其它样品，直至样品熬化即可关掉火，冷却后调解PH值。酸性用氢氧化钠调节、碱性用盐酸进行调节，将在1200C高压灭菌15min即可。　　无菌生理盐水：准确称取氯化钠溶于1000ml蒸馏水中。　　无菌水：吸取1000ml的蒸馏水，将在1200C高压灭菌15min即可。　　1moL/L氢氧化钠：称取40g的氢氧化钠溶于1000ml的蒸馏水中在1200C高压灭菌15min即可。　　75%的酒精：分别吸取400ml的95%的无水乙醇和100ml的蒸馏水与500ml的容量瓶中。　　1moL/LDE盐酸：移取浓盐酸90ml，用蒸馏水稀释至1000ml，在1200C高压灭菌15min即可。　　三．试验步骤　　1、样品的稀释　　固体和半固体样品：称取25g样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000r/min～10000r/min均质1min～2(来自:写论文网:观察菌落实验报告)min，或放入盛有225ml稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1min～2min，制成1:10的样品匀液。　　液体样品：以无菌吸管吸取25ml样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。36℃〒1℃48h〒2h.　　2、检样与接种：25g(ml)样品+225ml稀释液，均质，10倍系列稀释选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液，各取1ml分别加入　　无菌培养皿内。　　用1ml无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1ml，沿管壁缓慢注于盛有9ml稀释液的无菌试管中，振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100的样品匀液。　　按上述操作程序，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次1ml无菌吸管或吸头。　　根据对样品污染状况的估计，选择2个～3个适宜稀释度的样品匀液，在进行10倍递增稀释时，吸取1ml样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，分别吸取1ml空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。　　3、倒平板：在酒精灯开着的条件下进行到培养皿的3分之一即可，而其中琼脂的温度需要在46℃即可倒入琼脂，不然会影响其细菌的生长繁殖。平板计数琼脂培养基，混匀.　　4、培养：待琼脂凝固后，将平板翻转，36℃〒1℃培养48h〒2h。水产品30℃〒1℃培养72h〒3h。如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时，可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基，凝固后翻转平板，　　5、报告　　6.菌落计数　　可用肉眼观察，必要时用放大镜或菌落计数器，记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位表示。　　6.1选取菌落数在30CFU～300CFU之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30CFU的平板记录具体菌落数，大于300CFU的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。　　6.2其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数；若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2，代表一个平板菌落数。　　6.3当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时，则将每条单链作为一个菌落计数。　　7结果与报告　　菌落总数的计算方法　　若只有一个稀释度平板上