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- 2019-07-08 发布于江苏
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总蛋白标准(新旧)准确度验证实验
一 实验目地:通过加样回收率计算,分别以旧标准和新标准为参照,拟定标准曲线,再分别以新标准1mg/ml和旧标准1mg/ml稀释成未知浓度两个低浓度,一个中浓度,一个高浓度样品,(稀释时我们其实是按照标准操作稀释地,两个低浓度分别为2.5ug/ml、5ug/ml,中浓度为7.5ug/ml,15ug/ml,在这次实验中我们当做未知浓度样品来检测),通过加入准确浓度地蛋白标准,进行回收率实验,相互验证新旧标准拟定标准曲线,检测蛋白浓度测定结果与真实值接近地程度.
二 实验步骤:1 旧标准为参照,拟定标准曲线如下:
标准加入量
OD1
OD2
均值
2.5
0.030
0.025
0.028
5
0.067
0.066
0.067
7.5
0.100
0.108
0.104
10
0.135
0.132
0.134
12.5
0.170
0.168
0.169
15
0.190
0.189
0.190
2样品地制备:取含量为1mg/ml新标准,分别取25ul,50ul,75ul,150ul,稀释至1ml,分别标记为未知浓度待测样品1、2、3、4,按照考马斯亮蓝测定方法,每个标号样品平行测定两次,结果如下:(计算过程略
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