高效液相色谱.DOCVIP

LC-2000高效液相色谱仪操作规程 开 机 将待测样品按要求前处理，准备HPLC所需流动相，检查线路是否连接完好，废液瓶是否够用等； 开机：打开检测器（Detector）电源开关，待显示“OK”后打开泵（Pump）电源开关；打开进样器（Injector）开关，待检测器、泵、进样器显示稳定后，打开连接（Link）开关； 打开电脑，点击桌面上“Chrompass”程序，进入程序主界面； 编辑方法及样品分析 建立方法，“File”菜单中选择“New”中“New method”，设置方法信息包括分析时间、紫外吸收波长、流动相配（泵的最大压力设为30.0），流速（一般设0-2ml/min），保存方法（Save method）； 建立样品序列（Sequence）：点击“File” 选择其下方的“New”选项中“New sequence”，进入进样序列界面。“Method”中点击“▽”，选择自己建立的方法名称。在“RunName(Prefix)”（文件名前缀）输入英文字符，在“RunName(Suffix)”（文件命后缀）中输入为阿拉伯数字。（注意文件名不能相同，因为程序只承认文件名，若有重复的文件名，只会给出第一次出现的文件的结果） “Runtime”（进样时间）：与方法中的进样时间一致； “No. of injections”（进样针数）：根据自己需要确定，一般为1； “Vial#”（瓶号）：与进样器中进样瓶的位置号一致； “Rack#”（架号）：进样器的架号，为1； “Inj. Vol”（进样体积）：根据样品浓度确定，最大进样体积为100μL 走基线：进样前必须先走基线。点击“Acquision”，选择“Monitoring Baseline” 直至基线走平（吸光度稳定在0值附近，呈一直线）； 进样：打开进样序列界面（Sequence），点击“File”，选择“Open”选项中的“Open sequence”，选择序列名称（如Nap.SEQU），在进样瓶所对应序号“Enabled”处打勾，点击“开始”（Start）图标，开始进样； 数据分析 从“File”菜单中，选择“Open”选项中“Open Chrompass”，进入数据分析界面； 选择需要分析的文件名，点击“Open”，进入谱图界面。点击界面右上方“results”，在色谱图下方显示每个色谱峰信息； 关机 关机：依次关闭电脑、连接（Link）、进样器（Injector）、检测器（Detector）。 冲洗色谱柱：样品测完后，需要冲洗色谱柱。具体流程是：在程序主界面左下方点击“Systems”，查看仪器的连接状态，点击OFF（关闭泵），在泵的显示屏处，手动调至有机相流动泵（如D泵，甲醇相），打开Pump，冲洗10-20min，直至压力下降至稳定值； 手动关闭Pump，关闭泵电源； 注意事项 1. 流动相水相为超纯水（去离子水经二次处理制备），有机相为色谱级；含有水溶液类流动相需经0.45μm膜过滤，并超声脱气； 2. 实验前检查流动相、清洗进样针的溶液是否充足，更换泵前清洗液；实验后需将废液瓶中的溶液及时倒掉，反复冲洗废液瓶，剩余约1/5体积的自来水于废液瓶中； 3. 序列设置后或改变其中的选项需要及时保存方法； 4. 存储文件：在桌面上点击“我的电脑”，点击C盘，点击“Chrompass”，点击“Demodata” 将所有数据文件（文件名后缀为***.data）剪切至D盘/Date下； 5. 实验前后都要填写仪器使用登记表，试验完成后填写仪器使用纪录； 6. 正确操作仪器，使用过程中如发现仪器出现异常情况，应及时与实验室管理人员联系； 7. 要求用托盘盛放药品，避免药品直接放在实验台上，实验结束及时清洁实验台，带走所有试验试剂及样品； 8. 仪器使用人员有义务打扫实验室卫生； 9. 仪器使用人员有义务和责任负责实验室内实验仪器的安全； 10. 仪器使用人员有义务和责任负责实验室内水、电安全。