第2节 高效液相色谱仪 一、输液系统 3.洗脱方式 三、分离系统 2.填充剂-----最常用填充剂为化学键合硅胶 3.蒸发光散射检测 第10章 高效液相色谱分离检测技术 学习目标 知识目标 掌握化学键合相色谱法、离子色谱法和高效液相色谱的定性与定量分析方法;熟悉高效液相色谱仪的组成结构及其工作原理,了解毛细管电泳法、毛细管电泳仪组成结构、分离模式及应用和高效液相色谱分离方法选择与应用。 技能目标 掌握高效液相色谱仪使用操作技术,会运用高效液相色谱分离检测的技术,能对高效液相色谱仪进行简单维护。 高效液相色谱仪结构及流程 单柱塞往复泵结构示意图 1.高压输液泵 单柱塞往复泵 双柱塞往复泵(串或并联) 恒压泵(淘汰) 恒流泵 2.梯度洗脱装置 内梯度----高压泵将溶剂按程序压入混合室,混合后再注入色谱柱 外梯度---多元溶剂通过比例阀再由泵注入色谱柱 二元内梯度洗脱装置示意图 四元外梯度洗脱装置双泵(串联)工作原理示意图 等度洗脱 梯度洗脱 想一想 分别在何种情况下选择等度或梯度洗脱? 二、进样系统 1.六通阀进样器 2.自动进样器 1.色谱柱类型 常量柱内径2~4.6mm,柱长10~25cm 半微量柱:内径1~1.5mm,柱长10~20cm 毛细管柱:内径0.5~1mm,柱长30~75mm 分析型柱 制备型柱 内径20~40mm,
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