黄芩DNA指纹分析及质量相关研究-作物遗传育种专业毕业论文.docxVIP

摘 摘 要 本实验对黑龙江、河北、山东、山西、陕西、内蒙、甘肃、大连等不同产地， 及黑龙江、江西、陕西等不同种类(野生、人工种植)的黄芩样本共20份进行了 DNA指纹分析，并对质量的高低与DNA指纹图谱的相关性进行了研究。 l、从100个RAPD引物和30个ISSR引物中分别筛选出12和6个扩增条带清 晰，扩增结果稳定的引物。其中，3个RAPD引物和2个ISSR引物扩增出的条带可 以将高、中、低纬度的黄芩分开。用筛选出的引物对所有黄芩样本进行PCR扩增， 得到DNA指纹图谱，同时对电泳条带进行基于遗传相似度的聚类分析。从DNA指 纹图中可见高、中、低纬度的黄芩内部用同一引物扩增出的条带基本相同；在高、 中、低纬度的黄芩之间，仅有少数引物得到可以明确区分三者的不同条带。计算不 同居群内部的遗传相似度为0．936(高纬度)、0．954(中纬度)、0．892(低纬度)。这 与指纹图显示的信息一致，即不同纬度黄芩间的遗传有一定的变异．而居群内部的 变异很小。 2、采用高效液相色谱法(中国药典2000年版一部黄芩标准中含量的测定方法) 及毛细管电泳法，分别测定黄芩中黄芩苷的含量，经方法学验证，两种方法均符台 要求，具有较好的相关性(r=0．9621)。产于河北承德的野生黄芩中黄芩苷含量最高， 平均为18 5％。产于黑龙江及江磋、陕西的野生及人工栽培品种含量比较结果，黑龙 江野生品种与人工种植品种相比含量相近；江西、陕西的人工种植品种黄芩营含量 明显高于当地野生品种。 3、DNA指纹图谱与质量相关性研究结果表明：虽然不同品种的同～引物扩增出 的条带基本相同，但有少数引物扩增出的条带在黄芩苷含量高低品种间有明显区别。 质量好、含量高的DNA指纹图谱具有一条特异带，而其他的黄芩无此带。 4、中国中、北部地区(黑龙江、河北、内蒙为中心)是黄芩的主产区，产量高、 质量好。通过北、中、南部地区黄芩的DNA指纹图谱与质量相关性的研究，有利于 了解优质黄芩产地的遗传质量，经过筛选得到的RAPD及ISSR引物，可初步用于鉴 定黄芩质量优劣的特异性标记，为黄芩资源的保存及培育优良品种提供一定的理论 依据。 关键词黄芩：DNA指纹：质量相关 Studies Studies on Radix Scutellariae DNA Fingerprints and Quality Correlation ADSU’act Twenty Radix Scutellariae samples varied by different growing conditions(planting wildness)inHeilong}iang，JiangxiandShanxi，bydifferentproduelingare,a：Heilongjiang， Hebei，Shandong，Shanxi，Shanxi，Neimong,Gansu and Dalian were collected to analysed used DNA fingerprints．Meanwhile，the relation between their quality and DNA tingerprints was researched． 1．12．6 qualified fragments were selected from 100 RAPD primers and 30 ISSR primers．Among these selected primers only 3 RAPD and 2 ISSR primars could identify the three group：high．middle and low latitude Radix Scutellariae．DNA fingerprints were obtained by PCR with a11 selected primers and analyzed using cluster analysis The fingerprints indicated that amplified fragments ofthe same variety were almost the while only few primers could get the specific fragments able to identify the three groups． The genetic similarity of each group is：0．936(high latitude)，0．954(middle latitude)，and 0 892(10w latitude)．These figures provided the same