人支气管上皮细胞脂氧合酶介导苯并a芘所致氧化应激与DNA损伤.DOCVIP

人支气管上皮细胞5-脂氧合酶介导苯并(a)芘 所致氧化应激与DNA损伤 张杏娥, 黄云，武越，段燕英，胡建安** 中南大学公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学系，长沙，410078 目的 研究人支气管上皮细胞(HBE) 5-LOX介导B(a)P产生氧化应激以及氧化损伤作用，为LOX介导间接致癌物氧化应激所致DNA损伤及致癌的机制提供初步依据，进一步证明RNA干扰是LOX代谢活化作用研究中一种特异而有效的抑制策略。 方法 以不同浓度B(a)P（16μmol/L、32μmol/L、64μmol/L）染毒正常HBE细胞、经5-LOX基因沉默（5-LOX siRNA处理）的细胞以及对照细胞24小时，采用多功能荧光酶标仪测定细胞内活性氧（ROS）水平，分光光度计测量抗氧化酶类过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和非酶类抗氧化剂谷胱甘肽（GSH）活性，酶标仪检测细胞内8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）和丙二醛（MDA），Western blot检测细胞内核转录因子2(NF-E2/rf2 or Nrf2)蛋白表达。并检测特异性5-LOX抑制剂AA861及其它主要代谢酶类抑制剂对上述氧化应激和氧化损伤指标的影响。 结果 B(a)P可诱导HBE细胞内氧化应激指标ROS水平增加，抗氧化酶系统（SOD和CAT）活力增强和非酶类抗氧化剂GSH减少；同时B(a)P还可引起脂质和DNA氧化损伤指标MDA