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考点 74 固定化酶和固定化细胞技术
1.利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例
(1)高果糖浆的生产需要葡萄糖异构酶。
(2 )葡萄糖异构酶的优点:稳定性好、可以持续发挥作用。
(3 )在生产中直接使用酶的缺点:无法回收,造成浪费。
2.固定化酶的反应
如图为固定化酶的反应柱示意图
使用固定化酶技术,将这种酶(葡萄糖异构酶)固定在一种颗粒状的载体上,再将这些
酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着许多小孔的筛板。酶颗粒无法通过筛板
上的小孔,而反应溶液却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注
入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与固定化葡萄糖异构酶接触,转化成果糖,从反应柱的
下端流出。反应柱能连续使用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。
3.固定化细胞技术
(1)概念
讲解固定化细胞技术概念: 利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术。 细
胞中含有一系列酶, 在细胞正常生命活动的过程中, 通过代谢产生所需要的代谢产
物。
(2 )将酶或细胞固定化的方法
①包埋法:将酶(或细胞)包埋在细微网格里。
②化学结合法:将酶(或细胞)相互连接起来。
③吸附法:将酶(或细胞)吸附在载体表面上。
4 .固定化酶和固定化细胞的联系与区别
(1)联系:应用相同,都能催化某些反应。
(2 )区别
①固定化细胞技术操作容易,成本低,容易回收;
②固定化细胞技术对酶活性影响更小;
③固定化细胞固定的是一系列酶;
由于大分子难以通过细胞膜,固定化细胞的应用有一定的限制。
(3 )固定化酶和固定化细胞常用的载体材料
固定化酶和固定化细胞常用的载体材料有明胶、 琼脂糖、 海藻酸钠、 醋酸纤维素和
聚丙烯酰胺等,其共同的特点是不溶于水的多孔性载体。
5.制备固定化酵母细胞
(1)酵母细胞的活化
活化:让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。
本质:加快新陈代谢;方法:加入适量的水。
步骤:取 1 g 干酵母,放入 50 mL 的小烧杯中,加入蒸馏水 10mL,用玻璃棒搅拌,
使酵母细胞混合均匀,成糊状,放置 1h 左右使其活化。
2
(2 )配制物质的量浓度为 0.05 mol/L 的 CaCl 溶液
称取无水 CaCl 0.83 g ,放入 200 mL 的烧杯中,加入 150 mL 的蒸馏水,使其充分
2
溶解,待用。
(3 )配制海藻酸钠溶液
称取 0.7 g 海藻酸钠,放入 50 mL小烧杯中。加人 10 mL水,用酒精灯加热,边加
热边搅拌,将海藻酸钠调成糊状,直至完全溶化,用蒸馏水定容至 10 mL。注意,
加热时要用小火,或者间断加热,反复几次,直到海藻酸钠溶化为止。
(4 )海藻酸钠溶液与酵母细胞混合
将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温, 加入已活化的醉母细胞, 进行充分搅拌, 使
其混合均匀,再转移至注射器中。
(5 )固定化酵母细胞
以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 CaCl2 溶液中,观察液滴在
2 2
CaCl 溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在 CaCl 溶液中浸泡 30 min 左右。
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