罗勒多糖抗肿瘤效应及作用机制的研究-免疫学专业毕业论文.docxVIP

导师介绍曲迅，女，1958年11月出生，免疫学硕士，教授。 导师介绍 曲迅，女，1958年11月出生，免疫学硕士，教授。 现任山东大学齐鲁医院基础研究所所长。主要从事肿 瘤免疫及中西医结合抗肿瘤转移方面的研究。 学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本人独立完成的研究成果。 学位论文独创性声明 本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本人独立完成的研究成果。 文中引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意 义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的 论文或成果。 学位论文知识产权权属声明 本人在导师指导下所完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属山东省 医学科学院。山东省医学科学院享有以任何方式发表、复制、公开阅览、借阅 以及申请专利等权利。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的 学术论文或成果时，署名单位仍然为山东省医学科学院。 论文作者签名：生拦兰 日期：旦至j与L日 导师签名：邀 日期：卫蔓年三月壁同 露嗣山东省医学科学院研究生毕业论文罗勒多糖抗肿瘤效应及作用机制的研究 露嗣山东省医学科学院研究生毕业论文 罗勒多糖抗肿瘤效应及作用机制的研究 专业：免疫学 研究生：毕 正 导师： 曲迅 教授 中文摘要 研究表明恶性肿瘤患者普遍存在血液高粘、高凝、高聚状态，高粘度的血液有利于 肿瘤细胞的转移扩散。目前一些具有抗血小板凝集、抗肿瘤以及具有免疫刺激活性的活 血化淤中药在肿瘤防治过程中的作用引起了人们较多的关注。我们利用传统化瘀名方中 的一味具有抗血小板作用的药物全草植物中经分离、提取及初步精致得到的药物有效成 分罗勒多糖，本课题通过动物模型及对肿瘤细胞系的作用效果，观察罗勒多糖在动物体 内、体外对肿瘤细胞侵袭、转移行为的影响，为此药的进一步开发和临床推广应用提供 理论依据。本课题的研究内容主要包括对罗勒多糖处理后的3AO细胞增殖、侵袭功能及 其表面CD44分子表达的检测、罗勒多糖对卵巢癌大鼠模型及小鼠肿瘤肺转移模型的肿瘤 生长、侵袭和转移的影响、表达谱基因芯片对肿瘤侵袭相关基因的检测、分析等内容。 首先用流式细胞仪检测不同浓度罗勒多糖处理的3AO细胞表面CD44的表达情况。药 物作用48小时后，CD44的表达量明显降低(PO．05)，说明罗勒多糖能够明显的降低CD44 的表达。同时用Maetrigel穿膜法检测了罗勒多糖对3AO细胞侵袭性的影响，罗勒多糖 作用后有侵袭力并能穿过人工基底膜的3AO细胞数呈显著下降趋势；用MTT法检测了不 同浓度的中药罗勒多糖对人卵巢癌细胞3AO增殖活性的影响，结果显示大剂量及中剂量 中药罗勒多糖作用后，3AO细胞增殖活性受到了明显的抑制(P0．05)。 通过腹腔注射建立荷NuTu—19卵巢癌大鼠模型，以灌胃给药的方式用罗勒多糖和生 理盐水处理，从腹水量、腹腔脏器转移程度、肿瘤结节大小、大网膜转移情况及生存期 等方面观察各组肿瘤生长及转移情况，发现罗勒多糖处理组以上各项指标均优于献水对 照组。通过小鼠肿瘤肺转移模型(Lewis肺癌自发转移)的建立，分别用不同浓度的罗勒 多塘进行治疗，以生理盐水作为对照，结果发现罗勒多糖对肿瘤的肺转移具有显著的抵 抗作用，不仅使转移结节数明显减少，而且侵袭范围明显缩小。 取药物组与盐水对照组脾组织，提取总RNA、逆转录、PCR扩增、标已后与R20s大 鼠表达谱芯片杂交，经GenePix Pro 3．0图像处理软件分析，获得大量差异表达基因， -鼋嗣山东省医学科学院研究生毕业论文通过对s[L一4R、Annexin -鼋嗣山东省医学科学院研究生毕业论文 通过对s[L一4R、Annexin I、MIIC I等差异表达基因的分析对罗泐多糖的抗肿瘤效应机制 进行了探讨．认为罗勒多糖可以通过抑制Th2类细胞的活性，增强抗肿瘤的细胞免疫的 功能：可通过上调Annexin I抑制磷脂酶A2的活性．阻断了由PGE2介导的Thl类细胞 及其产生的细胞因子的抑制作用，提高了细胞免疫的功能，阻断了PAF介导的促凝过程， 改善血液流变学状态来抑制肿瘤的恶性表型；还可通过上调淋巴细胞表面MHC分子的表 达提高机体的免疫状态，抵抗肿瘤的恶性侵袭。 由上述动物体内、体外实验可认为罗勒多糖具有较强的抑制肿瘤侵袭和转移的作用， 其抗肿瘤侵袭、转移是多个药效靶点综合作用的结果，具有较广阔的应用前景。 关键词：肿瘤细胞系动物模型表达谱芯片功能分析 山东省医学科学院研究生毕业论文Research 山东省医学科学院研究生毕业论文 Research on antitumor effects and the mechanism of basil polysaccharide Major：Immunology Postgraduate：B