抗组胺药抑制中波紫外线辐射诱导IL-6生成的研究-皮肤性病学专业毕业论文.docxVIP

南京医科大学硕士学位论文英文缩写注释 南京医科大学硕士学位论文 英文缩写注释 KC 角质形成细胞 UV 紫外线 UVA 长波紫外线 UVB 中波紫外线 UVC 短波紫外线 MHC 主要组织相容性复合体 IL 白介素 IFN—v 干扰素．y GM．CSF 粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子 G．CSF 粒细胞集落刺激因子 M．CSF 巨噬细胞集落刺激因子 TNF．a 肿瘤坏死因子一d KOF 角质形成细胞生长因子 KGFR 角质形成细胞生长因子受体 EGF 表皮生长因子 EGFR 表皮生长因子受体 PGE2 前列腺素E2 MIF 巨噬细胞移动抑制因子 TGF-B 转化生长因子一B 、，EG_F 血管肉皮细胞生长因子 KB、HaCaT 人类角质形成细胞株 Pare212 小鼠角质彤成细胞株 ELlSA 酶联免疫吸附试验 RT．PCR 反向转录聚合酶链反应 PIP2 磷酯酰肌醇二磷酸 1P3 三磷酸肌醇 DG 二酰基甘油 南京医科大学硕士学位论文PKC 南京医科大学硕士学位论文 PKC 蛋白激酶C AC 腺苷酸环化酶 CAⅣ衅 环磷酸腺苷 mRNA 信使核糖核酸 DMEM DMEM培养基 PBS 磷酸盐缓冲液 BB．UVB 宽谱中波紫外线 NB-UVB 窄谱中波紫外线 MED 最小红斑量 南京医科大学硕士学位论文抗组胺药抑制中波紫外线辐射诱导IL。6生成的研究 南京医科大学硕士学位论文 抗组胺药抑制中波紫外线辐射诱导IL。6生成的研究 摘要 ＼研究背景 人类角质形成细胞是皮肤免疫系统的重要组成部分，可分泌包括 IL．6等多种细胞因子，但其基础分泌量不多，当受到紫外线等外来因 素刺激时，则产生多种细胞因子与介质，直接或间接影响淋巴细胞与 用围细胞，在免疫调节、炎症发生及促进组织增生方面发挥重要作用， 紫外线特别是中波紫外线过量辐射是导致人类皮肤损伤的最重要原 因之一，不仅可引起炎症、晒伤、免疫系统改变，而且长期过量辐射 还可以引起皮肤老化，甚至诱发皮肤癌。角质形成细胞经紫外线辐射 后引起免疫系统改变，特别是细胞因子的量与质的变化起着重要作 用。IL，6是一在免疫调节。炎症发生及促进组织分化等方面起重要作 用的细胞因子，在银屑病及异位性皮炎等炎症性皮肤病的发生与发展 以及紫外线等刺激引发的急性红斑中，IL．6是彳艮重要的介质。研究中 波紫外线辐射对角质形成细胞分泌IL．6的影响以及如何抑制这种作 用有一定价值。j 目的 观察中波紫外线辐射对体外培养的角质形成细胞(HaCaT细胞) 产生IL-6的影响，H1受体阻滞剂异丙嗪与H2受体阻滞剂法莫替丁 有否及如何抑制上述作用。 方法 1．将培养的单层融合的对数生长期的HaCaT细胞以胰酶消化 后，台盼蓝拒染法计数活细胞数，以浓度为106／ml左右接种于24孔 细胞培养板，待细胞生长达70％一80％融合，吸去培养液，以0、100、 300、600J／m2的中波紫外线辐射，辐射后每孔均加入培养液300 u l， 分别于辐射后2、4、8、12、24和48h收集上清液。 2．将培养的HaCaT细胞辐射300 J／m2剂量的中波紫外线后，立 南京医科大学硕士学位论文即加入最终浓度分别为0、10～、10～、10～、10-8mol／L的异丙嗪，分 南京医科大学硕士学位论文 即加入最终浓度分别为0、10～、10～、10～、10-8mol／L的异丙嗪，分 别于4、12和24h收集上清液。 3．将培养的HaCaT细胞辐射300 J／m2剂量的中波紫外线后，立即 加入最终浓度分别为0、10。4、10一、10～、10。7mol／L的法莫替丁，分 别于4、12和24h收集上清液。 4．ELISA法测定上述上清液中IL．6浓度，并用方差分析处理上述 三组数据。 f结果 l与未辐射组相比，HaCaT细胞经300及600 J／m2剂量的中波紫 外线辐射后4h开始IL．6分泌显著增加，经100 J／m2剂量的中波紫外 线辐射后24h开始IL一6分泌显著增加(P0．05)。 2．与未加异丙嗪组相比，HaCaT细胞经300 J／ma辐射立即加入 10～、lO～、10。和10’8mol／L的异丙嗪后4h时均未见对HaCaT细胞分 泌IL．6的抑制，12h及24h时上述四种浓度的异丙嗪均能显著地抑制 HaCaT细胞对IL-6的分泌(P0．05)，其中12h、10≤mol／L异丙嗪的 抑制作用最强，对IL．6的抑制率达71．15％。 3．与未加法莫替丁组相比，HaCaT细胞经300 J／m2辐射立即加入 10q、10～、10‘6和10。7mol／L的法莫替丁后4h时均未见对HaCaT细胞 分泌IL一6的抑制，HaCaT细胞经300 Jim2辐射加入10。4及10。5mol／L 法莫替丁12h后开始、加入10’6及10‘7mol／L法莫替丁2