核酸化学与检测.pdf

核酸化学与检测 上海市临床检验中心 王庆忠 wangqingzhong@sccl.org.cn 主要内容 核酸的发现及与生命的关系 核酸化学基础 核酸的检测 2 第一部分 核酸的发现 及与生命的关系 3 • 早期发现- 1868年， 瑞士科学家 F. Miescher从外 科绷带脓细胞的核中分离出一种富含磷的有机物 质“核素” （nuclein），后称为核酸（nucleic acid）。 • 1944年，Avery等通过肺炎球菌转化试验，揭示 了核酸的生物学功能（以后大量实验都证明DNA 是遗传物质）。 4 1946年，Chargaff 法则 不同种生物DNA分子中的核苷酸排列顺序不同 (有种族特异性) 同种生物不同组织器官细胞中DNA分子的核苷 酸排列顺序相同 (无组织器官特异性) 某一特定生物，其DNA碱基组成恒定 任何生物DNA碱基组成都符合 A=T ， G=C， A+G=T+C 6 • 1953年， Watson和Crick 提出DNA结构的双螺 旋模型。(获得1962年的诺贝尔生理学奖 ) • 1958年，Crick 提出遗传信息传递的中心法则。 • 70年代 建立 DNA 重组技术。 • 80年代以后, 分子生物学、分子遗传学等学科突 飞猛进发展。 7 20世纪50年代揭示了DNA分子的双螺旋结构 模型和半保留复制 20世纪50年代末和60年代提出了 “中心法则” 和操纵子学说，并成功地破译了遗传密码 中心法则 遗传密码 64个密码子 61个代表各种氨基酸 （AUG起始密码） 3个密码子为终止子 （UAA、UAG、UGA） 操纵子 用基因表达调控的原理解释了酶诱导的本质 转录后基因沉默(PTGS)的发现 目的：1990年美国人纳波里利用转基因技 术将一种催生红色素的CHS基因插入牵 牛花中，期望得到更艳丽的花朵 结果：原来开紫花的花色没有加深，花 瓣变成了白色，或杂色 The Plant Cell, 2, 279-289, 1990 12 1998年，Andrew Fire等首次将正义链反义链RNA 混合注入线虫C.elegans中，观察到更强的基因表达 抑制。首次提出了RNA interference的概念 Double-stranded RNA sense antisense