黄芪甲甙对大鼠骨髓间充质干细胞表达多种造血相关因子的干预研究儿科学专业毕业论文.docxVIP

PAGE PAGE 10 黄芪甲甙对大鼠骨髓间充质干细胞表达多种造血 相关因子的干预研究 研究生：谭艳芳 导 师：殷小成 副教授 中文摘要 目的：探讨体外分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）的可行方法，并鉴 定生物学特性，为其进一步的分化研究及实际应用提供实验基础；初步探讨黄芪 甲甙对大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）促增殖及分泌多种造血相关因子的影响， 从而为黄芪甲甙在临床血液病中应用提供实验依据。 方法：取Wistar大鼠股骨、胫骨骨髓，采用全骨髓贴壁筛选法和单克隆培养法分 离培养骨髓间充质干细胞（MSCs），在显微镜下观察其细胞形态学特点，并通 过免疫细胞化学鉴定骨髓间充质干细胞（MSCs）生物学特性。用四氮哇蓝比色 法（MTT法）检测黄芪甲甙对MSCs增殖的影响，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR） 方法检测细胞因子的表达及黄芪甲甙对其表达细胞因子的影响。 结果：接种培养12~24小时后，大部分细胞贴壁，随时间的延长，可见细胞集落 式生长，呈成纤维细胞样，免疫细胞化学鉴定MSCs表面标志物CD44 阳性率约 为92.3％，CD45 阳性率约为6.9%。有干细胞因子（SCF）、血小板生成素（TPO）、 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、转化生长因子（TGF-β1）表达，不 表达白介素-3（IL-3）；加入不同浓度的黄芪甲甙与MSCs共培养24h、48h、7