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- 2019-05-18 发布于上海
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学位论文作者:平玉 日期:2016 年 5 月 26 日
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学位论文作者:平玉 日期:2016 年 5 月 26 日
中文摘要
中文摘要
慢性丙型肝炎患者外周血中调节性 T 细胞的特征及临床意义
硕士研究生:平 玉 导 师:张毅教授 中国 河南 郑州 450052
中文摘要
目的
丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)能够引起肝脏组织的损伤,从而造
成慢性炎症的发生,其中一小部分慢性炎症又会发展为肝硬化,肝癌[1, 2]。引 起慢性 HCV 感染的其中一个原因就是机体内免疫抑制系统的激活,其中有许多 免疫抑制细胞发挥着重要的作用,如调节性 T 细胞(Regulatory T cell, Treg)[ 3, 4]。 Treg 细胞在炎症部位的积累能够影响免疫效应细胞对病毒的清除,抑制这些细 胞的功能。近年来,大量研究证明了 Treg 细胞能够诱导免疫耐受,影响 HCV 特 异性的淋巴细胞的增殖、分化和细胞因子的释放[ 5, 6]。本研究主要收集慢性 HCV 感染的患者外周血,将 Treg 细胞分为三个亚群,检测这些患者外周血中 Treg 细 胞及三个亚群的比例以及外切核酸酶 CD39 、 CD73 和 转化生长因子 ?
(Transforming growth factor ?, TGF-?)的表达;同时体内和体外实验检测抗病 毒药物治疗或处理后 Treg 细胞及三个亚群的比例的变化;最终,本研究还比较 了获得稳定病毒学应答(Stable virological response,SVR)的患者和未获得 SVR 患者外周血中的 Treg 细胞及其三个亚群的比例,探究 Treg 细胞是否参与慢性炎 症的发生。
方法
研究对象主要为慢性丙型肝炎患者,这些患者都在 2013 年至 2015 年就诊
于郑州大学第一附属医院,其中慢性丙型肝炎患者收集了 105 例,健康对照收集
了 40 例。收取慢性丙型肝炎患者和健康对照的外周血,密度梯度离心法获得外
I
周血单个核细胞,并冻存部分细胞于-80℃备用;流式细胞术检测外周血中 Treg
细胞及三个亚群的比例和抑制性分子 CD39、CD73 和 TGF-?的表达,同时流式 细胞分选技术分选出纯化的 Treg 细胞;体外加抗病毒药物处理患者外周血单个 核细胞和纯化的 Treg 细胞,流式细胞术检测 Treg 细胞的比例变化或抑制性分子 CD39、CD73 和 TGF-?的变化。
结果
1. 与健康对照相比,慢性 HCV 患者外周血中总 Treg 细胞、rTreg 细胞和 aTreg
细胞的比例都有上调的趋势,而 non-Treg 细胞的比例没有明显的变化。
2. 慢性 HCV 感染的患者外周血中 aTreg 细胞上 CD39、CD73 和 TGF-?表达最高; 同时患者外周血中 CD4+CD25- T 细胞及 CD8+ T 细胞上也表达 CD39、CD73 和 TGF-?。
???HCV 基因型为 2a 和 1b 的患者,除了 non-Treg 细胞在不同的治疗阶段没有变 化,总 Treg、rTreg 和 nTreg 细胞的比例随着不同治疗周期有所变化。
4. 体外加药实验中,与抗病毒药物处理前相比,抗病毒药物处理后总 Treg、 non-Treg、rTreg、aTreg 比例都下降,non-Treg 和 aTreg 细胞分泌 TGF-?的量减 少;同时体外加药处理纯化的 Treg 细胞发现与抗病毒药物处理前相比,CD73 和 TGF??在抗病毒药物处理后比例下降。
???与未获得 SVR 的慢性 HCV 患者相比,获得 SVR 的慢性 HCV 患者外周血中 non-Treg 和 rTreg 细胞的比例没有明显的变化,总 Treg 和 rTreg 细胞的比例明显 下降。
结论
慢性 HCV
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