慢性丙型肝炎患者外周血中调节性T细胞的特征及临床意义-生物工程专业毕业论文.docxVIP

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  • 2019-05-18 发布于上海
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慢性丙型肝炎患者外周血中调节性T细胞的特征及临床意义-生物工程专业毕业论文.docx

万方数据 万方数据 原创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研 究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集 体,均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。 学位论文作者:平玉 日期:2016 年 5 月 26 日 学位论文使用授权声明 本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。 根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部 门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州 大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印、 缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学 位论文或与该学位论文直接相关的学术论文或成果时,第一署名单位仍然为郑 州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。 学位论文作者:平玉 日期:2016 年 5 月 26 日 中文摘要 中文摘要 慢性丙型肝炎患者外周血中调节性 T 细胞的特征及临床意义 硕士研究生:平 玉 导 师:张毅教授 中国 河南 郑州 450052 中文摘要 目的 丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)能够引起肝脏组织的损伤,从而造 成慢性炎症的发生,其中一小部分慢性炎症又会发展为肝硬化,肝癌[1, 2]。引 起慢性 HCV 感染的其中一个原因就是机体内免疫抑制系统的激活,其中有许多 免疫抑制细胞发挥着重要的作用,如调节性 T 细胞(Regulatory T cell, Treg)[ 3, 4]。 Treg 细胞在炎症部位的积累能够影响免疫效应细胞对病毒的清除,抑制这些细 胞的功能。近年来,大量研究证明了 Treg 细胞能够诱导免疫耐受,影响 HCV 特 异性的淋巴细胞的增殖、分化和细胞因子的释放[ 5, 6]。本研究主要收集慢性 HCV 感染的患者外周血,将 Treg 细胞分为三个亚群,检测这些患者外周血中 Treg 细 胞及三个亚群的比例以及外切核酸酶 CD39 、 CD73 和 转化生长因子 ? (Transforming growth factor ?, TGF-?)的表达;同时体内和体外实验检测抗病 毒药物治疗或处理后 Treg 细胞及三个亚群的比例的变化;最终,本研究还比较 了获得稳定病毒学应答(Stable virological response,SVR)的患者和未获得 SVR 患者外周血中的 Treg 细胞及其三个亚群的比例,探究 Treg 细胞是否参与慢性炎 症的发生。 方法 研究对象主要为慢性丙型肝炎患者,这些患者都在 2013 年至 2015 年就诊 于郑州大学第一附属医院,其中慢性丙型肝炎患者收集了 105 例,健康对照收集 了 40 例。收取慢性丙型肝炎患者和健康对照的外周血,密度梯度离心法获得外 I 周血单个核细胞,并冻存部分细胞于-80℃备用;流式细胞术检测外周血中 Treg 细胞及三个亚群的比例和抑制性分子 CD39、CD73 和 TGF-?的表达,同时流式 细胞分选技术分选出纯化的 Treg 细胞;体外加抗病毒药物处理患者外周血单个 核细胞和纯化的 Treg 细胞,流式细胞术检测 Treg 细胞的比例变化或抑制性分子 CD39、CD73 和 TGF-?的变化。 结果 1. 与健康对照相比,慢性 HCV 患者外周血中总 Treg 细胞、rTreg 细胞和 aTreg 细胞的比例都有上调的趋势,而 non-Treg 细胞的比例没有明显的变化。 2. 慢性 HCV 感染的患者外周血中 aTreg 细胞上 CD39、CD73 和 TGF-?表达最高; 同时患者外周血中 CD4+CD25- T 细胞及 CD8+ T 细胞上也表达 CD39、CD73 和 TGF-?。 ???HCV 基因型为 2a 和 1b 的患者,除了 non-Treg 细胞在不同的治疗阶段没有变 化,总 Treg、rTreg 和 nTreg 细胞的比例随着不同治疗周期有所变化。 4. 体外加药实验中,与抗病毒药物处理前相比,抗病毒药物处理后总 Treg、 non-Treg、rTreg、aTreg 比例都下降,non-Treg 和 aTreg 细胞分泌 TGF-?的量减 少;同时体外加药处理纯化的 Treg 细胞发现与抗病毒药物处理前相比,CD73 和 TGF??在抗病毒药物处理后比例下降。 ???与未获得 SVR 的慢性 HCV 患者相比,获得 SVR 的慢性 HCV 患者外周血中 non-Treg 和 rTreg 细胞的比例没有明显的变化,总 Treg 和 rTreg 细胞的比例明显 下降。 结论 慢性 HCV

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