结构光照明荧光显微镜突破衍射极限的原理和在生命科学中的应用.PDF

激光与光电子学进展 52, 010003(2015) Laser Optoelectronics Progress ©2015《中国激光》杂志社 结构光照明荧光显微镜突破衍射极限的原理和在生 命科学中的应用 1,2,3 1,2,3 1 1 1 吴美瑞 杨西斌 熊大曦 李 辉 武晓东 1 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所江苏省医用光学重点实验室,江苏 苏州 215163 2 中国科学院长春光学精密机械与物理研究所,吉林 长春 130033 3 中国科学院大学,北京 100049 摘要 传统荧光显微镜的分辨率受到光学衍射极限的限制。使用结构光照明技术，可以实现突破衍射极限的超分辨 成像。相对于其他突破衍射极限的超分辨成像方法，结构光照明显微技术具有装置结构简单、成像速度快等优势，在 生命科学研究中发挥了重要作用。首先分析了基于结构光照明的二维超分辨率荧光成像、三维层析荧光成像和非线 性结构光照明超分辨荧光显微成像的原理和图像处理算法，并根据不同的结构光产生机理，对基于光栅光调制、基于 液晶空间光调制器光调制和基于数字微镜阵列光调制的结构光照明荧光显微镜装置做了阐述和比较，最后概述了结 构光照明荧光显微镜在观察生物样品结构特性和动态特性中的应用。 关键词 显微;荧光显微成像;结构光照明;衍射极限;超分辨成像 中图分类号 O438.2 文献标志码 A doi: 10.3788/LOP52.010003 StructuredIlluminationFluorescenceMicroscopy:Diffraction-Limit BreakingPrincipleandApplicationinLifeScience 1,2,3 1,2,3 1 1 1 WuMeirui YangXibin XiongDaxi LiHui WuXiaodong 1JiangsuKeyLaboratoryofMedicalOptics,SuzhouInstituteofBiomedicalEngineeringandTechnology, ChineseAcademyofSciences,Suzhou,Jiangsu 215163,China 2ChangchunInstituteofOptics,FineMechanicsandPhysics,ChineseAcademyofSciences, Changchun,Jilin 130033,China 3UniversityofChineseAcademyofSciences,Beijing 100049,China Abstract Resolutionoftraditionalfluorescencemicroscopyislimitedbythediffractionoflight.Diffraction limitcanbebrokenbystructuredilluminationtogethigherresolution.Comparedtoothersuper-resolution microscopytechniques,structuredilluminationfluorescencemicroscopycanachievehigherimagingspeedand needas