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- 2019-05-11 发布于山东
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实验三:PCR扩增检测乙肝病毒 ; 乙肝病毒(HBV)感染引起的乙型肝炎,我国发病率很高 ,HBV的检测极其重要。
HBV DNA存在就可以引起乙肝的传染,乙肝病毒基因是乙肝病毒的核心成分,是病毒复制的发动机 。 ; PCR技术可以检测出极微量的病毒,是判断其传染性最直接、最可靠的证据。PCR技术已成为公认的对病毒性肝炎的诊断、疗效观察及预防研究工作最理想的方法之一。
;;二、实验原理
聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction) 简称PCR,是在体外条件下利用DNA聚合酶、催化一对引物间的特异性DNA片段合成的基因体外扩增技术,它包括三个基本过程:;;;三、主要器材及试剂
1.主要器材:
; ;2.主要试剂:;四、操作步骤
1.标本处理:取患者血清40μl,加入DNA提取液40μl,沸水浴10分钟,10000转离心5分钟,取上清液4μl做PCR反应。
;2.加样???
加入提取好的标本4μl,6000转离心10秒。
; 三个扩增步骤温度及时间;;4.电泳检测:
①制备2%琼脂糖凝胶
;``;③
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