免疫及病原生物学试验指导试验室规则试验一免疫学基础.PDFVIP

免疫及病原生物学实验指导 免疫及病原生物学实验，是本课程理论教学的重要组成部分。 实验目的，旨在验证理论课中讲授的知识，加深对基本理论知识的理解。同时，学习和掌 握一定的基本技术技能，通过学生对常见病原生物性状的识别，粪、血等标本的检查，进一步 了解各种临床标本的诊断程序，培养学生的无菌观念,为今后学习传染病及从事临床护理工作提 供基础。 实验项目的完成，有的是通过老师示教，有的是学生自己操作，也可观看录像等。 实验方法与步骤，对实验中的具体操作给予了说明和提示。 实验室规则 免疫及病原微生物学实验的对象，大都是病原微生物，实验中常用到各种试剂和仪器设备， 因此，必须严格遵守实验室规则，认真规范化地进行实验操作。 一、树立无菌观念 进入实验室要穿好工作服，必要时还须戴帽子、口罩。只带有关的文具和讲义。 禁止吸烟，吐痰，吃零食。 不喧哗，不随便触摸物品。 用过的带菌器材，材料等应放入指定的容器消毒，如遇污染材料破碎或不慎污染其他物品， 应立即报告老师消毒，不得擅自处理。 离开实验室前，要用肥皂、消毒液或流水洗手，将工作服外面向内折好。 二、注意安全 酒精、盐酸、二甲苯等物品不可靠近火源，酒精灯不可互相点燃。 实验室内任何物品或材料不得带出室外。 三、爱护国家财产，节约实验用品 显微镜、标本等应注意保养，损坏器材应主动报告、登记并赔偿。 实验完毕，物归原处，整理桌面，需培养的物品送入培养箱。 值日生检查水电，关好门窗，然后离室。 [注意事项] 除了要结合实际介绍实验室规则以外，还要带学生看一看实验室的条件环境，常 用器材的安放场所，另外，还要向学生介绍贯穿于整个学期中的一些基本要求，如预习、认真 并实事求是地完成实验报告，对实验结果要结合理论进行分析，若实验结果不正确，要独立思 考找出原因等。 实验一：免疫学基础 一、实验目的： 1、熟悉免疫及病原微生物实验室规则。 2 、认识免疫器官胸腺、禽类的腔上囊。 3、熟悉吞噬细胞在免疫应答中的作用及其意义。 4 、观察豚鼠过敏性休克的现象并分析之。 5、 验证外毒素对机体的致病作用以及抗毒素对外毒素的中和作用。 二、实验项目： 1、胎儿胸腺、禽类腔上囊结构观察。（示教） 2、巨噬细胞的吞噬作用。（示教） 3、中性粒细胞的吞噬作用。（操作或示教） 4、豚鼠过敏性休克。（示教或看录像） 5、外毒素对机体的致病作用以及抗毒素对外毒素的中和作用。（录像） 三、实验方法与步骤： 1、胎儿胸腺、禽类腔上囊结构观察。（示教） 胎儿（4--6 个月）胸腺和腔上囊（雏鸡或其它禽类）标本。 2 、 2 、巨噬细胞的吞噬作用。（示教） 将2%无菌淀粉5 毫升注入豚鼠腹腔内。 6 小时后，将1—2%鸡红细胞悬液5 毫升注入豚鼠腹腔内。 注入鸡红细胞 3 小时后，用注射器抽取豚鼠腹腔滲出液，制成涂片，以瑞氏染色。观察有无 被单核巨噬细胞吞噬的鸡红细胞。 3、中性粒细胞的吞噬作用。（操作或示教） 在实验前一天，将2%无菌淀粉2 毫升注射入小白鼠的腹腔。 在实验前4 小时，将无菌生理盐水2 毫升注入小白鼠的腹腔。 实验前半小时，将葡萄球菌菌液0.3 毫升注入小白鼠的腹腔。注入空气 3 毫升，手持小白鼠 上下翻转，使腹腔内菌液冲开。 每隔30 分钟，吸取腹腔液涂片，做瑞氏染色，观察中性粒细胞内有无被吞噬的细菌。 4、豚鼠过敏性休克。（示教或看录像） （1）致敏注射：取体重约250 克的豚鼠3 只，编号。 1 号、2 号豚鼠分别腹腔注射1：2 稀 释的鸡蛋清0.1 毫升，3 号豚鼠不做任何注射。 （2 ）发敏注射：2—3 周后，1 号豚鼠心内注射不稀释的鸡蛋清1 毫升。 1—5 分钟后，观察豚鼠是否出现兴奋不安、抓鼻、呃逆、竖毛、呼吸困难、大小便失禁和痉 挛性跳跃等症状，若豚鼠出现上述症状，可在数分钟内死亡。由于动物个体反应性不同，有的 虽可出现上述反应，但侥幸免于死亡者，对鸡蛋清可暂时脱敏。 （3 ）