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胡萝卜组织培养程序
制作人:唐少 薛钰一、材料处理
把胡萝卜切成约4cm的段;
去除表皮;
靠外层切成约4x1x1cm的条,里面木质部和髓不要。
二、消毒和清洗
把切好的材料,放在100ml的烧杯里,加入75%酒精,浸泡30秒;
把酒精倒入废液瓶里,然后加入0.2%升汞,浸泡25-30分钟;
把带有升汞的烧杯拿到超净工作台,取出材料,放入培养皿,用灭菌水洗4-5分钟,重复3次。
三、接种
把洗净的材料用烧过的镊子夹到盛有滤纸的培养皿里,去除表面一层,然后切成约7x5x5mm的块;
把切好的材料,用烧过的镊子夹到锥形瓶里,3-5块/瓶。
注意事项:
防火。实验中要经常用酒精消毒、用酒精灯烧镊子、刀具,注意安全。
无菌操作。材料经升汞消毒后,即认为是消毒干净,此后的操作中的用具要求无菌。为防止染菌,注意:手要用酒精擦干净;镊子和刀经常在火焰上烧;锥形瓶、手不要放在盛材料的培养皿上方。
废液处理。酒精要回收,放原处;升汞有剧毒,小心不要溅出,废液倒回原处。
常见错误举例
托盘端到超净工作台里。
材料切得过小。
材料消毒时间过长。
切材料时下面没垫滤纸。
镊子、刀在酒精灯上烧过立即放到盛酒精的烧杯里。
操作时,手、三角烧瓶在盛材料的培养皿上方活动,容易把菌带到材料上。
把接种的切块压入培养基里面。
接种时瓶口垂直向上,手、镊子上的赃物容易掉到瓶里。
升汞回收倒入酒精桶里。
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