三种手性农药对映体选择性种间CYP450代谢差异研究-环境科学专业毕业论文.docxVIP

分类号： 分类号： $481．8 单位代码： !Q335 密 级： 学 号：212 1垒Qi垒 洳≥：j、嗡 硕士学位论文 中文论文题目 英文论文题目一Stereoselective Species-specific CYP450一 Biotransformation of Three Chiral Pesticides 论文提交日期 201 5．03．03 万方数据 III III H i ll nllillii翮ill l IIIIInI Y2788565 ⑧ 论文作者签名：邋丝 指导教师签名：五!l曼廷盔 论文评阅人1： 金±威 评阅人2： 赵羞蓥 评阅人3： 磕垒 评阅人4： 评阅人5： 答辩委员会主席： 赵差蓥 委员1： 文岳虫 委员2- 塞值蝰 委员3： 廑挝挞 委员4： 扬友星 委员5： 万方数据 独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其 他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得堂婆盘堂或其他教育机 构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献 均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：谢别至 签字日期： z汐够．年弓月f曰 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解逝婆盘堂有关保留、使用学位论文的规定， 有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和 借阅。本人授权逝婆太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：谢娃 新签名：：L导师签名： 毋L l咖犀l印件 签字日期：为J岁年；月f日 签字日期：≥’，·广年多月石日 学位论文作者毕业后去向： 工作单位： 电话： 通讯地址： 邮编： 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 谢维 中文摘要 三种手性农药对映体选择性种间CYP450代谢差异研究 摘要 研究背景：手性农药的广泛使用，使其不可避免的进入到各种环境系统，进 而可通过各种介质和途径进入生物体内，造成伤害。同一手性农药的不同对映体， 由于生化特性的不同，进入环境后往往具有不同的环境行为，其对生物及人体的 生理作用也具有对映体选择性差异，从而导致一系列截然不同急慢性毒性作用。 但长期以来，外消旋的手性农药都被当作一种化合物来研究其环境行为和生态毒 性效应。近年来有关手性农药对映体选择性环境毒性的研究已经引起了人们的热 切关注。另外，由于不同物种对进入其体内的手性化合物的对映体选择性降解存 在明显的种间差异，导致其在不同物种体内呈现不同的浓度和ER值，从而造成 的急慢性毒性效应也会存在种间差异。当前的研究已经关注到这一现象，但没有 深入探讨，关于手性农药对映体选择性种间代谢差异的原因，也未见报道。 研究方法：实验选取目前世界上使用最为广泛，且能代表杀虫、除草和杀菌 三种主要类型的手性农药：氟虫腈、禾草灵和甲霜灵为研究对象，以人肝癌细胞 系(HepG 2)、大鼠肝癌细胞系(H4IIE)、鸡肝癌细胞系(LMH)和草鱼肝脏 细胞系(L8824)这几种能代表高等脊椎动物的细胞系为研究模型。分别研究这 三种手性农药在上述物种细胞内代谢时主要的CYP450酶的诱导情况，看是否存 在明显的种间差异。进而以甲霜灵为例，用UPLC．MS／MS测定其经过这四种细 胞代谢24h后的残留及ER值的变化情况，比较其对映体选择性种间代谢差异， 和上述酶活实验结果的种间差异性相互映证。并通过添加不同的CYP450的特异 性抑制剂，来进一步验证上述对映体选择性种间代谢差异的产生与特定的 CYP450酶被诱导之间的关系。 研究结果：酶活实验中，不同的手性农药在同种物种细胞内代谢时，细胞内 主要的CYP450酶的诱导情况是不一样的，且同种手性农药在不同物种细胞体内 代谢时，诱导的CYP450酶的种类也存在种间差异，添加特异性的CYP450抑制 剂后，这些诱导的酶活可以得到相应的抑制。分析实验中，甲霜灵经四种物种细 胞代谢后，两种对映异构体的残留和ER值的情况变化存在明显的种间差异。 HepG 2、H4IIE和LMH细胞选择性代谢S-甲霜灵，L8824细胞选择性代谢R．甲 万方数据 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 谢维 中文摘要 霜灵。并且，添加上述酶活实验中被诱导的CYP450酶的特异性抑制剂后，这些 差异和变化都得到了相应的抑制。 研究结论：本研究表明，手性农药在不同物种细胞内代谢时存在明显的对映 体选择性种间代谢差