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标准操作规程 Standard Operating Procedure 文件编号 SOP/QC-041-04 非无菌产品微生物限度检查法标准操作规程 PAGE 3 第 第PAGE 14页 共14页 非无菌产品微生物限度检查法标准操作规程 部门/职务： Department/Post 签字/日期： Signature/Date 起草人： Prepared by 质量部/QC 年 月 日 审核人： Reviewed by 质量部/QC主管 年 月 日 批准人： Approved by 质量部/质量负责人 年 月 日 颁发部门 Issued by 质量部 执行日期 Effective Date 年 月 日 替换文件 Replaced For 《微生物限度检查法标准操作规程》（SOP-检验通则-047-02） 分发给 Distributed to 质量部 1.目的 规范微生物限度检查所用的培养基、检查方法、操作步骤、结果分析，以便对检品作出正确的微生物学评价。 2.范围 本公司检品的微生物限度检查。 3.职责 QC主管和QC检验员对本标准负责。 4.参考或引用文件 《中华人民共和国药典》(2015年版) 《药品生产质量管理规范》2010年版 5.内容 5.1简述：微生物计数法系用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。 5.2药品微生物限度检查法总则： 5.2.1抽样： 5.2.1.1供试品一般按批号随机抽样。 5.2.1.2抽样量一般为检验用量（2个以上最小包装单位）的3倍量。 5.2.2供试品保存： 5.2.2.1供试品在检验之前，应保存在阴凉干燥处，以防供试品中的污染菌因保藏条件不当而引起致死、损伤或繁殖。 5.2.2.2供试品在检验之前，应该保持原有包装状态，严禁开启，包装已开启的样品不得作为供试品。 5.2.3 培养基及其制备方法： 5.2.3.1 胰酪大豆胨液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基等照各自说明书上配制方法制备。 5.2.4 供试品的检验量： 5.2.4.1 一般供试品检验量为10g或 5.2.4.2 供试品须取自2个以上的包装单位。 5.2.5 计数培养基适用性检査和供试品计数方法适用性试验 5.2.5.1 供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。 5.2.5.2 供试品的微生物计数方法应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。 5.2.5.3 若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，计数方法应重新进行适用性试验。 5.2.5.4 菌种： 5.2.5.4.1 试验用菌株的传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0 5.2.5.5 菌液制备： 5.2.5.5.1 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培养物加入3~5ml含0.05% (m l/m l)聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的pH7.0无菌氣化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌氯 5.2.5.5.2 菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2~8℃，可在24小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在2~8℃， 5.2.5.6 阴性对照：为确认试验条件是否符合要求，应进行阴性对照试验，阴性对照试验应无菌生长。如阴性对照有菌生长，应进行偏差调查。 5.2.5.7 培养基适用性检査： 5.2.5.7.1 5.2.5.7.2 接种不大于100cfu的菌液至胰酪大豆胨液体培养基管或胰酪大豆胨琼脂培养基平板或沙氏葡萄糖琼脂培养基平板，置规定条件下培养。每一试验菌株平行制备2管或2个平皿。同时，用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。 5.2.5.7.3 被检固体培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5?2范围内，且菌落形态大小应与对照培养基上的菌落一致；被检液体培养基管与对照培养基管比较，试验菌应生长良好。 5.2.5.8 计数方法适用性试验 5.2.5.8.1 供试液制备 5.2.5.8.1.1 根