三种细胞因子组合诱导小鼠骨髓间充质干细胞跨越分化肝细胞的研究-细胞生物学专业论文.docxVIP

浙江大学硕士学位论文中文摘要 浙江大学硕士学位论文 中文摘要 成体干细胞的可塑性是目前细胞生物学的热点话题，特定的组织干／祖细胞 具有多项分化潜能，不仅可以分化为同一胚层来源的细胞，而且可以跨胚层“横 向分化”(Trans-differentiation)为不同胚层来源的细胞。但对干细胞的研究还是 体内实验为主，没有成熟的体外分离培养肝干细胞的方法。骨髓问充质于细胞具 有自我更新和多向分化潜能的特性。一些研究表明经适当处理或是在合适微环境 下，骨髓来源的细胞可以在体外mRNA水平上表达多种肝脏特异性基因，表明 骨髓可以作为一种肝细胞的祖细胞来源。为探讨体外成年小鼠骨髓间充质干细胞 饵M MSCs)是否可通过三种细胞因子组合诱导定向分化为肝细胞，我们从小鼠骨 髓中获得间充质干细胞，用添加20ng／ml HGF、10ng／ml FGF-4、10ng／ml OSM和 10％NBS的IMDM培养液诱导这些细胞向肝细胞分化．诱导组细胞出现肝细胞 样形态变化；培养第10天出现AFP基因表达，其中AFP第加天表达减弱：第 15天开始出现ALl]、CKl8基因表达，而后持续到20天；第20天出现TAT表 达。免疫荧光反应表明，培养20天时ALB、CKl8表达为阳性；诱导20天的细 胞PAS糖元合成反应呈阳性。从而，骨髓间充质干细胞可在HGEFGF4和OSM 三种细胞因子组合诱导下跨越分化为肝细胞。