山苦菜组织培养及高效再生体系建立的研究-植物学专业毕业论文.docxVIP

辽宁师范大学硕士学位论文摘 辽宁师范大学硕士学位论文 摘 要 山苦菜[Ixeris chinensis(Thunb．)Nakai】，属菊科，苦荬菜属多年生草本植物。由于 其具有重要的食用和药用价值，人们对之非常亲睐。野生资源已不能满足需要，人工栽 培速度亦较慢，故寻求山苦菜快速繁殖的方法尤为重要。本研究通过诱导山苦菜愈伤组 织再分化及山苦菜直接分化两种途径成功地建立了山苦菜高效再生体系，具体结果： 1．愈伤组织诱导、继代及分化 (1)愈伤组织诱导：以山苦菜茎段为材料，采用平放和斜插的方式培养，成功得到结 果：最佳培养基为恒温光照条件下的MS+BAl．0 mg·LJ+NAA0．1 mg·L。1+蔗糖30 g·L～， 且平放的嫩茎诱导效果较好，诱导率达到100％。 (2)愈伤组织继代：MS+BAl．0 mg·L。1+NAA0．1 mg·L。+蔗糖30 g·L‘1是愈伤组织继代 的最佳培养基；在恒温光照、恒温无光和变温光照下进行愈伤组织继代培养，30 d后的 增殖倍数分别为25．2倍、12．7倍和9．8倍，恒温光照是山苦菜愈伤组织继代的最佳条件。 (3)愈伤组织分化：愈伤组织分化最佳培养基是恒温光照条件下1／2MS+蔗糖15 g·L～， 分化率为100％，平均每块分化出5．6个不定芽，平均苗长达到1．2 cm。 2．不同材料及条件对山苦菜直接分化的影响 分别以山苦菜茎尖、叶片、叶柄和茎段为外植体，直接诱导不定芽。结果表明：茎 段为理想材料，最佳培养基为MS+BA0．5 mg·L。1+IBA0．5 mg·L‘1+KT0．5 mg·L。1+蔗糖 30 g·L～，分化率达100％，平均每个茎段分化出56个高度为2．1．3．4 cm的直接分化芽。 3．不同条件对分化芽生根的影响 不同条件下分化芽生根的结果证明：1／4MS+IAA0．2 mg·L。1+蔗糖20 g·L。1是山苦菜 分化芽生根的理想培养基，恒温光照条件下生根效果最好，在3种接种方式中以正插生 根效果最佳，生根率达100％，平均每株试管苗生根7．6条、每条根的平均长度4．22 cm。 4．试管苗生根培养的增殖 试管苗生根继代培养25 d后，试管苗成活率和生根率均为1 00％，平均增殖倍数达 到了4．8倍，且生根情况较理想，几乎没有无效苗。按此速度，理论上1株试管苗1年 能繁殖出4．814‘6(约为8．8×105万)株试管苗。 5．炼苗、移栽与定植 山苦菜再生苗移栽的理想基质是1／2园土+1／2河沙，移栽成活率为96．5％，定植的 成活率为99％。定植成活的试管苗生长非常旺盛，并保持了山苦菜的所有生物学性状。 关键词：山苦菜；组织培养；直接分化；快速繁殖；再生体系 山苦菜组织培养及高效再生体系建立的研究Tissue 山苦菜组织培养及高效再生体系建立的研究 Tissue Culture and High Efficient Regeneration System’S Establishment of lxeris c办f，ze忍J如(Thunb．)Nakai Abstract lxeris chinensis(Thunb．)Nakai is perennial herb plant belongs to Composite family and Ixeris Cass．More and more people like it because of its important edible and medicinal value．Wild resources Call not meet the needs of people and the speed of artificial cultivation is slow，SO it’S particularly important to seek the method for rapid propagation．Induce callus differentiation and direct differentiation Can both obtain regeneration seedlings of lxeris chinensis，the high efficient regeneration system of lxeris chinensis was successfully established，specific results are shown as follows： 1．Callus induction．multiplication and differentiation (1)Callus induction Tender stems without buds oflxeris