中文摘要-朝阳科技大学机构典藏系统.PDFVIP

中文摘要 當修飾體制素中位置四的賴胺酸時對生長激素之抑制只有些許的影響，然而 當修飾位置九的賴胺酸時會使其完全喪失對生長激素之抑制。為了解體制素中二 賴胺酸殘基所扮演之角色，使用固相胜肽合成法合成體制素變異物(SRIF-14 K4 9 →A 及SRIF-14 K →A)，再使用多維核磁共振光譜技術及圓二色光譜技術研究原 生體制素及其類似物之間的構型有何差異，並以螢光光譜及脈衝磁場梯度核磁共 振技術比較原生體制素及二變異物與微胞鍵結性質之差異。由化學位移差值及 CD 實驗結果皆顯示原生體制素及其變異物在與陰電性微胞SDS作用時具有類似 之構型。但螢光光譜結果顯示當原生體制素中賴胺酸被丙胺酸取代後會造成分子 疏水性增強使螢光強度變弱。此三段胜肽進入微胞溶液中後其螢光光譜皆有藍位 移及強度減弱之現象，顯示三段胜肽與陰電性微胞 SDS 作用時色胺酸殘基皆進 入微胞疏水性的環境中。PFG-NMR 實驗結果顯示體制素及其變異物在水溶液及 4 在陰電性微胞 SDS 溶液中之擴散係數順序皆為：SRIF-14＞SRIF-14 K →A＞ 9 SRIF-14 K →A。根據PFG-NMR 實驗測量得到之擴散係數可換算求得胜肽與微 胞作用之結合常數。結果顯示三段胜肽與陰電性微胞 SDS 的結合常數大小順序 9 4 為：SRIF-14 K →A＞SRIF-14 K →A＞SRIF-14。綜合上述結果顯示當第九位置 上之賴胺酸被丙胺酸取代後，其疏水性明顯增強，並因而導致其與陰電性 SDS 微胞結合作用之增強。且其改變皆比當第四位置上賴胺酸被丙胺酸取代及原生體 9 4 制素強。而在調節胜肽與微胞間之結合上 Lys 似乎較 Lys 更具關鍵性。此一特 9 6 7 8 9 10 性將促使包含 Lys 在內之活性中心部位(Phe -Phe -Trp -Lys -Thr )能夠以適當之 位置與方式與受體結合，進而展現出各類生化活性。本研究之初步結論可供為進 一步了解體制素與受體作用機制之基礎。 關鍵詞：體制素、核磁共振光譜、磁場梯度、圓二色光譜 Abstract When somatostatin was modified at the fourth residue (lysine), the activity of the growth hormone was only slightly affected. However, mutation of the position 9 lysine resulted in complete loss of activity of the hormone. The goal of this research was to investigate the role of the lysine residues in the function of the hormone. Two 4 9 somatostatin analogues, SRIF-14 K →A and SRIF-14 K →A, were synthesized in solid phase. The structures of somatostatin and its analogues were studied by comp