雷公藤对CIA模型肠道黏膜免疫的影响-中西医结合基础专业论文.docx

源创t陡声察本人郑煎声明：所呈交的学位论文，是强导师的指导下独立 源创t陡声察 本人郑煎声明：所呈交的学位论文，是强导师的指导下独立 完成的。文中除注明引用的内容外，不包含任何其他已经发表的科 研成果。对本文研究做出羹要贡献者，已在文中以明确方式表明。 本声明的法律责任完全由肉己承担。 论文律者签名q@嗫论文律者签名 ‘湖 导师签名导师签名 H期口步一乡哆f 关于学位论文使用授权的声稍 本人完全知道中髫中医研究院有关保留使鞠学位论文妁规 定，斌意学校保蜜或向基家有关部门规梅送交论文麴爱露俸孝毫子 版，允许被查阅和惜阋。本人授权中国中医研究院可以将本学位论 文鼹全部或部分蠹卷熊入有关数耱瘴遣季亍梭索，可以采j{l彩带，缩 印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。 论文作者签名 韬期 D_5一手一；7 中国中医研究院博士毕业论文 中国中医研究院博士毕业论文 中文摘要 中文摘要 一、目的 从黏膜免疫，免疫学及病理学的角度探讨雷公藤对胶原免疫 性关节炎(collageninduced arthritis，cIA)的作用机制。 二、方法 选用DBA／1小鼠和DA大鼠作为实验对象，用II型胶原加完 全佐剂造成关节炎动物模型，并分别用雷公藤甲素进行治疗。大 体观察动物关节炎指数、胸腺系数、脾系数、小肠派氏小结计数； 动态观察小鼠血清中T细胞亚群变化(DBA／1为28d、42d、60d； DA为：21d、30d、60d)及60d派氏小结T细胞亚群变化；酶联免 疫吸附法(Enzyme—Linked Immunoadsorbent Assay，ELISA)检测血 清中抗CII抗体含量，转化生长因子．D(Transform Growth Facmr． D，TGF—D)、干扰素一v(Interferon．v，IFN—Y)细胞因子含量； MTT法检测脾淋巴细胞增殖能力；另外，对DBA／1小鼠进行小肠 上皮内淋巴细胞(Intraepithelial lymphocyte，IEL)、固有层 淋巴细胞【Laminaproprialymphocyte，LPL)及派氏小结(Peyer’S Patches，PP)中T细胞亚群变化、派氏小结淋巴细胞凋亡情况、关 节局部IFN．v表达了检测；采用免疫组化方法对DA大鼠进行了 小肠CD4、CD8、sIgA、TGF—D、IFN—Y阳性细胞表达进行了检 测，采用免疫荧光法检测了关节局部IFN—v表达情况。同时光镜 下观察各组动物踝、膝关节的病理变化。 三、结果 (一)关节局部结聚显示：两种动物模型组关节指数明显增大， RT-PCR及免疫荧光巍示局部细胞因子IFN—v含攫增加，光镜观察 CIA短臻胃觅滢簇细胞港垒明显，淆臻缀织充血永瓣，毛细血管增 生，血管翳形成，并可见炎细胞浸润。雷公藤治疗后可以显著减 第3页 中国中医研究院博+毕业论文 中国中医研究院博+毕业论文 中文摘要 小其关节指数，局部细胞因子IFN—v含量减少，滑膜细胞增生及 滑膜组织充血水肿明显减轻，浸润的炎细胞数量和血管翳形成显 著减少，软骨破坏减轻。 (二)小肠派氏小结计数：CIA组派氏小结数量明显增多。雷公 藤治疗后小肠派氏小结数量减少。 (三)淋巴器官系数及淋巴细胞增殖实验结果：各组问胸腺系数 均无差异。CIA组脾脏系数较空白对照组明显升高，雷公藤组脾脏 系数较CIA组显著降低，但与正常组比较无显著差异。CIA组对 刀豆蛋白A(ConcanavalinA，ConA)诱导的脾细胞增殖反应能力均 较空白对照组明显升高，但细菌脂多糖(Lipopolysacchafide，LPSl 诱导的增殖能力则表现不一，在DBA／1小鼠无明显变化，而在DA 大鼠则表现为升高。雷公藤能降低ConA诱导的细胞增殖。 f疆)盘演申TGF一§、IFN—v本平静捡澜结暴燕示：CIA缝蛊 清中TGF一0含量显著下降，说明TGF．p在CIA的发病中起着制 抑作耀。两个治疗组可明显升篱血清中TGF一§水平，说明霍公藤 均可以通过舟离血清中TGF．§水平而挢荆CIA的发病；CIA组血 清中IFN—Y含量显著升高，说明CIA与RA一样，是辅助性T细 憨亚群I(Thl)生攥戆因子参饶势的疾痰，雷公藤可以洚镌蛊瀵中IFN。 v水平，从而抑制病程的发展。TGF。p属于Th2型细胞因子，因 此雷公藤可以下调IFN．v，上调TGF一§，通过调节Thl／Th2平餐 网络来治疗C搬。 (五)血清中抗CII