桑叶多糖的分离纯化及其组成研究-制药工程专业论文.docxVIP

摘要桑叶多糖是良好的Q．葡萄糖苷酶竞争性抑制剂，在治疗糖尿病方面具有很 摘要 桑叶多糖是良好的Q．葡萄糖苷酶竞争性抑制剂，在治疗糖尿病方面具有很 好的应用前景，将其开发为治疗糖尿病的药物具有重大的经济价值和社会效益。 本文在本课题组前期研究的基础上完善了桑叶多糖的测定方法，对桑叶多糖 进行了进一步分离纯化，并对桑叶多糖的单糖组成及红外光谱特性进行了初步研 究。 首先，本文建立了糖醛酸含量的测定方法一间羟基联苯法，确立了该法的较 优测定条件：四硼酸钠．硫酸溶液的用量为6．0ml，加热时间为lOmin，显色剂间 羟联苯的用量为lOOul，显色后40min测定溶液吸光度。此外，还考察了间羟基 联苯法与中性糖的测定方法一葸酮硫酸法间的相互影响，实验结果表明：糖醛酸 的含量测定不受中性糖的影响，但中性糖的含量测定受糖醛酸的影响，通过校正 后，测定结果与理论值接近，可以作为中性糖含量测定的方法。 其次，本文通过实验测定了四种不同产地桑叶中中性糖和糖醛酸含量，其中 河南桑叶含量最高；考察了絮凝工艺对桑叶多糖的纯化效果，实验结果表明，提 取液絮凝后，多糖损失率较高，多糖含量并没有很大的提高，絮凝工艺不宜用于 桑叶多糖的纯化；考察了多次醇沉工艺，结果表明多次醇沉工艺损失率较高，且 纯度提高不大；考察了分级醇沉工艺，结果表明分级醇沉工艺对桑叶多糖的分级 纯化效果较明显，其中20％醇沉物为桑叶多糖的主要存在形式，中性糖含量为 14．09％，糖醛酸含量为45．53％；考察了活性炭脱色工艺，获得较优的脱色工艺 条件：脱色温度为70℃，脱色液pH为6．0，脱色时间为60min，活性炭用量为 4％；经过活性炭脱色后的，20％醇沉物中中性糖含量提高到21．87％，糖醛酸含 量提高到57．43％，损失较小，仅为8．35％；进而通过离子交换层析后中性糖含 量提高到24．2 1％，糖醛酸含量提高到64．23％。 最后，通过薄层层析和气相色谱分析，确定了桑叶多糖的单糖组成，桑叶多 糖主要由鼠李糖和糖醛酸组成，是一种鼠李糖半乳糖醛酸聚糖。IR图谱表明桑 叶多糖中含有糖醛酸，其组成单糖为吡哺糖。 关键词：桑叶；多糖；糖醛酸；分离；纯化；组成 AB AB STRACT Mulberry leaves polysaccharides(MLPs)are considered tO be an excellent competitive inhibitor of a-glycosidase for glucose releasing．Consequently,it has good application prospect in the treatment of diabetes with mulberry leaves polysaccharides，and it is realistic and meaningful tO develop the MLPs into a medicine for diabetes． Based on the previous work done by the other members of our lab，the method for the determination of polysaccharides was improved，and the mulberry leaves polysaccharides were further purified by a sequence of purification processes． Preliminary study on the monosaccharide composition of MLPs and analyse of the Infrared Spectrum Characteristics analysis of MLPs was also carried out． Firstly,a method for the quantitative determination of uronic acid with m-hydroxydiphenyl was established，and the optimum conditions of determination were studied．The optimum Na28407-H2S04 dosage of 6．0ml，heating time of 1 0min， m—hydroxydiphenyl dosage of l OOul，and coloration time of 40min were acquired． Besides，the interaction between the determination