实验二、补骨脂黄酮体的提取、分离及鉴定.pptVIP

聚酰胺“双重色谱”原理 正相色谱 反相色谱 聚酰胺：极性固定相（极性酰胺基团） 非极性固定相（非极性脂肪链） 洗脱剂：有机溶剂（氯仿-甲醇，极性小） 含水溶剂（甲醇-水，极性大） 先洗脱：游离黄酮（苷元，极性小） 苷（极性大）（柱色谱分离） Rf值： 苷元 苷 苷元 苷（TLC色谱鉴别） ***上述规律也适用于黄酮类化合物在聚酰胺薄层上的行为。 苷与苷元聚酰胺色谱 * 感谢你的观看 2109年5月18日 聚酰胺层析系统原理 其酰胺基可与酚羟基、羧基、羰基、硝基等形成氢键吸附。 * 感谢你的观看 2109年5月18日 聚酰胺是分离黄酮类化合物的比较理想的吸附剂，其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中酚羟基的数目、位置以及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。黄酮类化合物从聚酰胺色谱柱上洗脱大致遵循下列规律： * 感谢你的观看 2109年5月18日 A. 化合物中酚羟基数目越多，被聚酰胺吸附越牢，越难洗脱。 酚羟基数目相同时，聚酰胺对邻位羟基吸附弱于间、对位，容易洗脱。 B. 共轭系统多的形成氢键能力强，因此黄酮类化合物骨架不同，聚酰胺的吸附能力也不同，吸附能力从小到大依次为：异黄酮 二氢黄酮 黄酮 黄酮醇 * 感谢你的观看 2109年5月18日 C. 有分子内氢键的羟基吸附弱 . D. 苷元相同，洗脱顺序一般是：叁糖苷，双糖苷，单糖苷，苷元 * 感谢你的观看 2109年5月18日 黄酮 定义：两个苯环（A与B环）通过三个碳原子相互联结而成的一系列化合物。（C6-C3-C6） 母核：2—苯基色原酮 分布：多存在于高等植物中，是数量最多的天然酚性化合物。 O O 1 2 3 6 4 5 7 8 1 2 3 4 5 6 * 感谢你的观看 2109年5月18日 性质 1．酸性 （1）来源：酚羟基（ 数目、位置） （2）酸性规律 a、7，4‘-OH酸性强于其他位置羟基的酸性（处于羰基对位，羰基的共轭诱导）。 b、5-OH酸性最弱（处于羰基邻位，形成分子内氢键）。 c、酚羟基数目越多，酸性越强。 * 感谢你的观看 2109年5月18日 应用：pH梯度法分离 7，4′-OH 7或4′-OH 其他位-OH 5-OH NaHCO3 + - - - Na2CO3 + + - - NaOH + + + + * 感谢你的观看 2109年5月18日 2.碱性： γ-吡喃酮环1-氧原子 微弱碱性（孤对电子，接受质子） 仅溶于强的、浓酸 +水 （浓硫酸） 烊 盐（呈色） 应用 初步鉴别黄酮母核类型：黄酮、黄酮醇 —— 黄~橙色，并有荧光 二氢黄酮 —— 橙红（冷）、紫红（热） 查耳酮 —— 橙红~洋红 异黄酮（二氢）—— 黄色 橙酮 —— 红~洋红 * 感谢你的观看 2109年5月18日 显色反应 1．还原显色反应 反应类型 鉴别特征 鉴别意义 备注 盐酸-镁粉 黄酮、二氢黄酮、 红~紫红 黄酮类特征性 假阳性 反应 黄酮醇、二氢黄酮醇 红~紫红 鉴别反应