山羊卵丘细胞核移植技术研究-动物遗传育种与繁殖专业论文.docxVIP

摘要体细胞核移植技术对于动物育种、保种和濒危动物保护、科学实验及发育生物学 摘要 体细胞核移植技术对于动物育种、保种和濒危动物保护、科学实验及发育生物学 等基础理论的研究均有重要意义，但目前体细胞克隆成功率较低，已成为制约这一技 术应用的主要障碍，因此完善体细胞核移植技术体系，探求核移植机理乃是当前急需 解决的问题。 本研究探讨了秋水仙碱化学去核法在山羊卵母细胞去核中的应用及其对卵丘细 胞核移植胚胎体外发育的影响，并用组蛋白去乙酰化抑制剂—髑A处理核移植供体 卵丘细胞及山羊卵母细胞以提高核移植胚胎组蛋白乙酰化水平，探讨了组蛋白乙酰化 水平的提高对山羊卵丘细胞核移植胚胎体外发育的影响。 研究发现用秋水仙碱处理山羊体外成熟19h的卵母细胞可使卵母细胞核区形成 胞质突起，以此为指示进行显微操作去核率可达100％，且研究发现用O．8,ug／ml的秋 水仙碱处理30 111in山羊卵母细胞突起率可达91．27％，显著高于对照组及0．4。ug／ml处 理组(P0．05)，与1．6ug／ml处理组的突起率差异不显著(P0．05)；通过比较盲吸去 核法与秋水仙碱化学去核法构建的山羊卵丘细胞核移植胚胎的体外发育能力发现：秋 水仙碱化学去核法构建的重构胚桑椹胚发育率显著高于盲吸去核法(P0．05)； 用不同浓度TSA处理山羊卵丘细胞19h后发现400nM TSA处理组核移植胚胎融 合率显著高于对照组(