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《细胞生物学实验》教学大纲 　　课程名称：细胞生物学实验 　　课程编号　　课程类别：专业基础课/必修课 　　学时/学分： 24/0.75 　　开设学期：第四学期 　　 说明 　　一、课程性质 　　细胞生物学实验是生物科学和生物工程专业一门重要的必修基础课程，在生命学科的本科教学中有着十分重要的地位。通过实验，不仅使学生加深对细胞生物学理论知识的理解和认证，同时通过对细胞生命现象的观察和亲手操作，使学生获得有关细胞生命活动的感性知识，有效地提高理论课的教学效果，并使学生掌握细胞生物学实验的基本原理、方法和技能，培养和提高学生实验设计和应用各种实验技术的能力，培养和训练学生的创新意识和创新能力，培养严谨的科学态度和实事求是的作风，提高发现问题、分析问题和解决问题的能力，为今后独立从事教学或科学研究打下坚实的基础。 　　二、教学目标 　　通过细胞生物学实验，使学生们更加牢固地掌握细胞生物学基本知识和基本理论，对细胞的结构和功能有全面、真实的认识，使学生们掌握细胞生物学的基本实验方法和技能。 　　三、学时分配表 序号 　　实验项目 实验 时数 实验 类型 　　内容与要求 小计 实验1 细胞膜的渗透性及细胞凝集反应 4 设计性 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度，掌握细胞凝集反应的实验方法及细胞凝集的原理 实验2 叶绿体的分离与荧光观察 3 验证性 掌握荧光显微镜的原理和使用方法；观察叶绿体的自发荧光与次生荧光； 通过对植物叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法 实验3 植物细胞骨架的观察 4 验证性 掌握光学显微镜观察植物细胞骨架的原理和方法 实验4 鸡血细胞的体外融合 6 综合性 了解PEG诱导细胞融合的基本原理，通过PEG诱导鸡红细胞之间的融合实验，初步掌握细胞融合技术 实验5 巨噬细胞吞噬现象的观察 7 综合性 通过对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞的活动观察，加深理解细胞吞噬作用的过程和意义；掌握小白鼠腹腔注射给药方法和颈椎脱臼处死法 合计 24 　　四、实验方法与要求建议 　　本课程采用传统的实验教学方法，2人一组操作，结合多媒体、小组讨论与集体讨论、实验设计、教学录像、细胞生物学小知识和小技巧介绍等多种教学手段，帮助学生通过本课程的学习全面地掌握细胞生物学的基本实验方法与技能以及实验设计的思路，以提高学生从事教学和科学研究的综合素质。 　　要求学生认真预习，熟悉实验的内容，了解所用的仪器用具；实验中严格按操作规程进行，仔细观察，及时记录实验现象及结果，认真做好每一天的实验报告；实验结束后仔细分析和总结实验结果；使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，对任何自己不熟悉的实验仪器都不要随意操作；在操作过程中发现任何意外现象都要及时向任课教师报告；在实验过程中制造的任何垃圾都要丢到垃圾筐里（或先放在自己的桌面废物缸内），严禁随地投弃。 　　五、考核方式及要求 　　1.考核方式：考试（√）；考查（） 　　2.成绩评定： 　　计分制：百分制（√）；五级分制（ ）；两级分制（ ） 　　成绩构成：实验成绩（100分）=实验预习（10％）+实验态度、卫生、安全（10％）+实验操作（25％）+实验报告（25％）+实验考试（30％）。 　　 本文 实验一 ?细胞膜的渗透性及细胞凝集反应 一、实验性质 实验类别：专业基础课/必修 实验类型：设计性 计划学时：4学时 实验分组：2人/组 　　二、实验目的 　　1.了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度，分析影响细胞膜渗透性的因素； 　　2.理解凝集素使细胞发生凝集反应的原理，观察细胞的凝集现象。 　　三、实验的基本内容和要求 　　1.制备羊血细胞悬液，加1份羊血和10份0.17mol/LNaCl溶液。 　　2.制备土豆凝集素的。 　　3.取10支试管分别加入1mL稀释羊血和10mL不同浓度的试剂，观察是否溶血，如不溶血，观察溶液的颜色有无深浅的变化。 　　4.用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞悬液各一滴，置载玻片上，充分混匀，静置20min后于低倍镜下观察血球凝集现象。以PBS液加2%红细胞悬液作对照实验。 　　四、实验仪器设备及材料 　　10ml移液管、1ml移液管、试管架 、试管、烧杯、显微镜、粗天平、载玻片、盖玻片、土豆块茎、0.17mol/L氯化钠、0.17mol/L硝酸钠、0.12mol/L硫酸钠、0.17mol/L氯化铵、0.17mol/L醋酸铵、0.12mol/L草酸铵、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、0.32mol/L乙醇、0.32mol/L丙酮、新鲜羊血（加抗凝剂）、PBS缓冲液 　　五、实验操作要点 　　1.血细胞悬液的制备 　　2.低渗溶液