果蝇综合大实验.docVIP

动物遗传学实验四川农业大学 PAGE \* Arabic 1 / NUMPAGES \* Arabic 8 果蝇综合大实验 摘要：一对同源染色体上的致死基因（l、Cy）形成了平衡致死系，本实验研究在这种情况下的果蝇基因分离定律、自由组合定律以及伴性遗传，选择研究的相对性状是正常翅（c）与卷翅（Cy）、白眼（Xｗ）与橙眼（XB），实验亲本为正常翅白眼与卷翅橙眼的正反交。通过使用??2检验（α=0.05），确定两个培养瓶（正交直翅杂交组与反交卷翅杂交组）中的果蝇统计值与理论值差异不显著，另外两培养瓶（正交卷翅杂交组与反交直翅杂交组）中果蝇得统计值与理论值显著不符合。 第一部分? 果蝇性别鉴定、性状观察与饲养方法 一、实验目的 1、了解果蝇的生活史； 2、掌握果蝇的麻醉及观察方法； 3、通过实验学习掌握果蝇性别的鉴定方法； 4、了解果蝇的饲养方法； 5、仔细观察并记录实验室各品系果蝇的性状。 ? 二、实验内容 （一）果蝇的生活史 果蝇属于昆虫纲，双翅目，与家蝇是不同的种。它的生活史包括：卵→幼虫→蛹→成虫。 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它生活周期延长，同时生活力也减低，果蝇培养的最适温度20—25℃。 10 ℃ 15 ℃ 20 ℃ 25℃ 卵 → 幼虫 8天 5天 幼虫→成虫 57天 20天 7天 4天 从表中可以看出25℃时，从卵到成虫约10天；在25℃时成虫约活15天。 果蝇一般是培养在恒温箱内，盛夏时，要注意降温。 ? （二）果蝇是遗传学分析的好材料 (1)生长迅速，生活史较短，短时间内可获得大量子代； (2)容易饲养，在常温下以玉米粉做饲料就可使之生长繁殖； (3)染色体数目少，加之唾腺染色体巨大，是细胞学观察的好材料； (4)突变性状多，且多数是形态突变，便于观察。 ? （三）果蝇的麻醉及观察方法 （1）对果蝇进行检查时，可用乙醚麻醉，使它保持静止状态。因果蝇对乙醚很敏感，易麻醉，麻醉的深度看实验要求而定(作种蝇以轻度麻醉为宜，做观察可深度麻醉，致死也无妨。果蝇翅膀外展45℃角表示已死)。 （2）麻醉时将乙醚(2－3滴)滴到麻醉瓶塞的绵球上(注意不要让乙醚流到瓶内)，同时麻醉瓶要保持干燥，否则会粘住果蝇翅膀。 （3）将培养瓶倒置，让果蝇向瓶底部运动，然后打开麻醉瓶和培养瓶塞，迅速将两者瓶口相接(麻醉瓶在上，培养瓶在下)，轻拍培养瓶壁使果蝇落入麻醉瓶中，迅速盖好两个瓶塞，并倒置麻醉瓶，一分钟后果蝇即处于昏迷状态。 （4）麻醉后的果蝇放在白瓷板上，用毛笔轻轻拨动进行观察。必要时可进行第二次麻醉。观察完毕后倒入煤油或酒精瓶中(死蝇盛留器)。 ? （四）果蝇的雌雄鉴别 （1）果蝇有雌雄之分，幼虫期区别较难，成虫区别容易。 （2）雌性体型较大，腹部环纹7节，末端尖，颜色浅，跗节前端无黑色鬃毛流苏。 （3） 雄性体型较小，腹部环纹5节，末端钝而圆，颜色深。第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏，称 性梳。 ? （五）果蝇的培养 A、培养基的制备 果蝇在水果摊或果园里常可见到，但它并不是以水果为生，而是食生长在水果上的酵母菌，因此实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇饲料。 ? ??目前本实验室所用的果蝇培养基配方如下： A：葡萄糖10克，琼脂1.5克，加水65毫升，煮沸溶解。 B：玉米粉12克，加水50毫升，混合均匀。 将B 慢慢倒入A中，并不停搅动混合，加热成糊状后，再加一勺酵母膏，混合均匀，稍冷却后加入1毫升丙酸，调匀后即可分装到培养瓶中。 ?B、培养容器 ??? 培养果蝇的饲养瓶，常用的有牛奶瓶，大中型指管，用纱布包裹的棉花球作瓶塞（有条件的地方可改用泡沫塑料作瓶塞）。 饲养瓶先消毒，然后倒入饲料（2厘米厚），待冷却后，用酒精棉擦瓶壁，然后滴入酵母菌液数滴，再插入消毒过的吸水纸，作为幼虫化蛹时的干燥场所。 ? C、原种培养 在作为新的留种培养时，事先检查一下果蝇有没有混杂，以防原种丢失。亲本的数目一般每瓶5—10对，移入新培养瓶时，须将瓶横卧，然后将果蝇挑入，待果蝇清醒过来后，再????? 把培养瓶竖起，以防果蝇粘在培养基上。 原种每2－4周换一次培养基（按温度而定），每一原种培养至少保留两套。培养瓶上标签要写明名称，培养日期等，作为原种培养，可控制到10—15℃，培养时避免日光直射。 第二部分 果蝇设计实验 一、实验目的 ? 1、理解基因分离定律、自由组合定律的原理，正确认识伴性遗传的正反交的差别。 2、在有致死基因的条件下验证基因分离定律、自由组合定律以及伴性遗传。 3、掌握果蝇两对基因杂交试验，学习实验数据收集和统计处理方法。 二、实验原