基于对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸光致电化学响应的胆汁酸传感器-应用化学.PDF

第３３卷 第１期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．３３Ｉｓｓ．１ ２０１６年１月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ｊａｎ．２０１６ 基于对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸光致电化学 响应的胆汁酸传感器  赵常志 　孔燕云　何艳艳　张兆霞 （青岛科技大学化学与分子工程学院，生化分析山东省重点实验室　山东 青岛２６６０４２） 摘　要　将硫堇电聚合在多壁碳纳米管修饰电极上，然后在其表面固定３羟类固醇脱氢酶制备了胆汁酸传 α 感器。由于该传感器具有光敏和电子受体功能的光电界面，同时偶合了光致电化学效应和酶促反应，能与 ３羟类固醇脱氢酶催化胆汁酸产生的电子供体ＮＡＤＨ（烟酰胺腺嘌呤二核苷酸）产生光致电化学反应，通过 α 测量反应产生的光电流实现了对胆汁酸的检测。探讨了胆汁酸传感器对胆汁酸的光致电化学响应机理，研究 了多壁碳纳米管、酶固定量和硫堇初始浓度对光电极性能的影响。在优化了电解质溶液ｐＨ值、辅酶用量和偏 压的测试条件下，该传感器对胆汁酸的测定范围为１８０～４００ ｍｏｌ／Ｌ，检出限为０６７ ｍｏｌ／Ｌ。应用该传感 μ μ 器对药品胆酸钠片和人尿中胆汁酸进行的检测结果显示，相对标准偏差小于 ５６４％，加标回收率为 ９６％～１０４％。该传感器的制备和对胆汁酸的检测不需要除氧，有经济、简便等优点。 关键词　胆汁酸传感器；光致电化学；多壁碳纳米管；硫堇；烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 中图分类号：Ｏ６５７．１　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１６）０１０１１６０７ ＤＯＩ：１０．１１９４４／ｊ．ｉｓｓｎ．１００００５１８．２０１６．０１．１５０２３９ 胆汁酸（ＢＡ，ｂｉｌｅａｃｉｄ）为胆汗的主要成分，是几种结构类似的类固醇酸的统称。在人类的胆汁中， 游离的胆酸、脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸、石胆酸及其它们与甘氨酸、牛磺酸、硫酸、葡糖醛酸等有机酸相结合 ［１］ 的衍生物是胆汁酸的主要存在形式 。ＢＡ作用于人体的肠肝循环系统，能促进对脂类物质的消化和吸 收，有调节血压、强心、解热、镇痉镇咳、利胆、抑菌、抗炎以及免疫调节等作用。作为检测肝病的生物学 指标， ＢＡ常用于评价肝脏的健康状况，总胆汁酸（ＴＢＡ）的明显升高会提示肝细胞发生病变，预示患急、 ［２３］ ［４］ ［５］ 慢性肝炎，甚至肝硬化和肝癌的可能 。测定ＢＡ的方法主要有高效液相色谱法 、液质联用技术 、 ［６］ ［７８］ 酶法 等，也有胆酸盐选择性液膜电极和石英晶体微天平ＢＡ传感器的报道 。液相色谱法需要衍生 和水解，测定过程较为繁琐；而液质联用分析法的成本较高，不适合临床检测。基于３羟类固醇脱氢 α 酶（３ＨＳＤ）的酶法能可逆地催化Ｃ ～Ｃ类固醇３位羟基／酮基的氧化还原，而ＢＡ是３ＨＳＤ的作用 α １９ ２７ α ［９］ 底物之一，因此临床上常用３ＨＳＤ作为工具酶来测定ＴＢＡ 。但该法一般采用光度法测量吸光度的 α 变化，灵敏度不高。所以，发展新的ＴＢＡ检测方法具有重要的意义。光致电化学分析法及其传感器选择 性好、灵敏