利用藻类生物反应器生产试剂级藻蓝蛋白的研究-海洋生物学专业论文.docxVIP

利用藻类生物反应器生产试剂级藻蓝蛋白的研究摘要 利用藻类生物反应器生产试剂级藻蓝蛋白的研究 摘要 试剂级藻蓝蛋白(A。。。／A2804)的克级规模生产，需要有稳定的原料来 源和高效的分离纯化手段。 根据藻类生长特点，综合比较了用于藻类培养的光生物反应器的类型特点和 发展现状，提出一种新型藻类生物反应器的设计思想。在此基础上，研制成功气 升式内导流藻类生物反应器，并获得国家专利(ZLO)。 利用研制的藻类生物反应器培养螺旋藻，用于藻蓝蛋白的生产。通过对反应 器中光照、温度、营养盐的控制，培养得到高藻蓝蛋白含量的螺旋藻，藻蓝蛋白 含量达到藻体干重的20％。螺旋藻在反应器中的生长速率可达到O．36 g DW／ L·d，最大比生长速度为0．32 d～。 自行研制的分离介质采用国产试剂合成，降低了藻蓝蛋白纯化成本。通过反 复冻融法从螺旋藻中提取藻蓝蛋白，再经预处理、2次柱层析，获得纯度A620／A280 =4．13的C·藻蓝蛋白和纯度A650，A2∞=3．3的别藻蓝蛋白，总得率约为30％。比 国外沿用的实验室提取纯化藻蓝蛋白的方法简化了2-4个步骤，提高了产率。 关键词：藻胆蛋白 藻蓝蛋白 光生物反应器 螺旋藻 Stud Stud i es on the product i on of pure phycocyan i n by ai r I ift aIga photobioreactor Abstract There are two keys to obtain the production ofpure phycocyanin(Areax／A2so 4)as gram scale，one is the supplying of algae as phycocyanin source，the other one is an efficient method to extract and purify the protein． A kind of airlift alga photobioreactor has been designed on the basis of the growth habit ofalgae．And several types ofphotobioreactors used for microalgae have been compared． Spirulina platensis was cultivated in the photobioreactor newly designed under low light intensities in the presence of abundant nutrients，and the content of phycobiliproteins enhanced，up to ca．20％ofthe algal dry weight．The growth rate of Spirulina platensis in the photobioreactor can be up to O．36 g DW／L‘d． A low cost chromatography media was synthesized．Phycobiliproteins extracted from algae cell by several frozen·thaw．The raw phycoeyanin solution was chromatographically separated twice by the chromedia after pre—treatment．Pure C—phycocyanin(A620／A280=4．13)andpartlypure allophycocyanin(A6so／A28023．3) were obtained．The total yield of CPC was about 30％． Key word：phyeobiliprotein phycocyanin photobioreactor 0前言藻胆蛋白(Phycobiliprotein)是蓝藻、红藻、隐藻和某些甲藻所特有的捕光 0前言 藻胆蛋白(Phycobiliprotein)是蓝藻、红藻、隐藻和某些甲藻所特有的捕光 色素，在光合作用中起捕获和传递光能的作用。早在30亿年前蓝藻出现时，藻 胆蛋白就作为主要的捕光色素参与到植物的光合作用中，在光合生物进化中占有 重要地位(曾呈奎，周百成，1983；1984)。 藻胆蛋白是一类水溶性色蛋白，出色基通过硫醚键与载体蛋白共价交联形成 稳定的复合物。其色基统称为藻胆素(phycobilins)，为丌链四毗咯结构，有藻 红胆素(PEB)