第四章 DNA 的反应过程.pptVIP

SEQ 1( CAP) 207 AAGGTAATTTCCTAACGGCCC SEQ 2( CON-TREM.UK) 162 CAGCACTTTAGCTGGACAGAA SEQ 3( RIEMS,C) 208 AAGGTAATTTCCTAACGGCCC SEQ 4( CHINESE) 221 TAAGGTAATTTCTAACGGCCC SEQ 5( ALFORT-187) 208 AAGGTAATTTCCTAACGGCCC SEQ 6( P97) 162 CAGCACTTTAGCTGGAGGGAA SEQ 7( D4990.I) 162 CAGCACTTTAGCTGGAGGAAA SEQ 8( GLENTORF) 162 AGCACTTTAGCTGGAAGGAAA SEQ 9( ALFORT-A19) 208 AAGGTAATTTCCTAACGGCCC SEQ10( GPE-) 208 AAGGTAATTTCCTAACGGCCC SEQ11( 19.SK) 161 CAGCACTTTAGCTGGAGGAAA SEQ12( SHIMEN) 208 AAGGTAATTTCCTAACGGCCC SEQ13( HCLV) 218 TAAGGTAATTTCTAACGGCCC SEQ14( MOORE.UK) 162 CAGCACTTTAGCTGGAAGGAA SEQ15( ALD) 208 AAGGTAATTTCCTAACGGCCC SEQ16( OLD-LEDER.US) 162 CAGCACTTTAGCTGGAAGGAA SEQ17( BRESCIA) 207 AAGGTAATTTCCTAACGGCCC SEQ18( ALFORT) 207 AGGTAATTTCCTAACGGCCCC SEQ19( U744.D) 162 CAGCACTTTAGCTGGAGGAAA SEQ20( A.SK) 161 CAGCACTTTAGCTGGAGGAAA 微生物种类的名称 复制原点的序列 复制原点的位置 2，DNA polymerase 1）不能从头起始（de novo initiation） 2）以dATP, dGTP, dCTP, dTTP 为底物 3）需要模板 4）对模板高度忠实性 严格地配对 及时地修复 5）种类多样，组成复杂 6）需要其它因子参与, 要模板 7）高度的进行性 8）一致的空间结构，相似的作用机理 原核的三种 PolⅠ PolⅡ PolⅢ 真核的五种 Polα Polβ Polγ Polδ Polε DNA polymerase 的结构模型 手指 手掌 拇指 手指 拇指 手掌 （活性中心） 模板进入 外切酶 活性区 T7 DNA polymerase 的晶体结构模型 手指 拇指 模板进入 手掌 （活性中心） 外切酶 活性区 3，引发酶（primase） 一种RNA聚合酶 1) T7 噬菌体primase 基因4的产物（gp4), 566aa, 63 KDa 合成引物的长度为4-5 引物序列一般为pppAC(N)2-3 识别位点的序列为 CTG gp4 有两种功能 primase helicase 2) E.coli. primase 基因dnaG的产物, 581aa, 60 KDa 合成引物的长度为10-12 引物序列一般为pppAG(N)8-10 识别位点的序列为 CTG 需要helicase的辅助 3) T4 噬菌体 primase 基因61的产物（gp61), 342aa, 44 KDa 合成引物的长度为4-5 引物序列一般为pppAC(N)2-3 识别位点的序列为 GTT gp61常与gp41（helicase）形成复合体而工作 3) Yeast primase 由2个亚基组成，62 KDa， 48 KDa 合成引物的长度为8-10 引物序列一般为ppp(A/G)(N)7-9 无特别的识别序列