生物化学 第3章节 氨基酸资料文档.pptVIP

第3章 氨基酸;氨基酸－蛋白质的构件分子;蛋白质的基本结构单位──氨基酸;一、 α－氨基酸的一般结构;二、氨基酸的分类;二、氨基酸的分类; 甘氨酸（Gly,G） 丙氨酸（Ala, A） 缬氨酸（Val, V）;丝氨酸（Ser, S） 苏氨酸（Thr, T）;半胱氨酸（Cys, C） 甲硫氨酸（Met, M）;;;芳香族氨基酸; His经常参与酶的活性中心的构成,它是唯一 一个R基(咪唑基)的pKa值在7附近的AA. ;根据R-基团的极性，将氨基酸分为两类：;非极性氨基酸;极性不带电荷;带正电荷的R基氨基酸;带负电荷的R基氨基酸;三、氨基酸的性质;氨基酸的兼性离子形式;氨基酸的解离; 在适当的酸碱度时，氨基酸的氨基和羧基的解离度完全相等。此时，[正离子]=[负离子]，净电荷为零，在电场中既不向阳极移动，也不向阴极移动，成为两性离子。这时氨基酸所处溶液的pH值称为该氨基酸的等电点，以pI符号表示。;氨基酸的等电点求法：;氨基酸的解离常数可用测定滴定曲线的实验方法求得;以甘氨酸（Gly）为例;根据平衡常数公式可得： pH=pKa+lg[质子受体]/[质子供体] 氨基酸的带电状况与溶液的pH有关。改变pH可以使氨基酸带上正电荷或负电荷，也可使处于兼性离子状态。; 当氨基酸完全质子化时（即处于酸性溶液时），再用碱滴定;a1;=;结论： 氨基酸的等电点相当于该氨基酸的两性离子状态两侧基团pK值之和的一半。 即pI＝1/2（pKa1+pKa2） 侧链上有解离基团的氨基酸的pI如何计算？;（1）首先氨基酸完全质子化； （2）写出其解离方程式： ①先解离α-COOH, 再解离侧链基团上的COOH; ②再解离α-NH3+, 最后解离侧链基团上的NH3+。 （3）标出各解离步骤的pK值，最后以两性离子状态 两侧基团pK值之和的一半计算其等电点。;例如： （1）Glu的pK1(α-COOH)=2.19， pK2(γ- COOH)=4.25，pK3(α- NH3+)=9.67,计算其pI值。 （2）Lys的pK1(α-COOH)=2.18, pK2(α-NH3+)=8.95，pK3(ε- NH3+)=10.53，计算其pI值。 ;氨基酸等电点的计算;等电点的应用： 1.氨基酸在等电点时溶解度最小。 2.利用不同氨基酸等电点不同，可利用电泳的方式分离氨基酸。;氨基酸的化学反应;(一)由氨基参加的反应;1. 与HNO2的反应;2.酰基化和羟基化反应;（1）酰基化试剂在多肽和蛋白质的人工合成中被用 作氨基的保护试剂。 酰化试剂：苄氧酰氯、叔丁氧甲酰氯、对-甲苯磺酰氯、 邻苯二甲酸酐 ;★丹磺酰氯（DNS-cl，5—二甲基氨基萘-1-磺酰氯）常用于多肽链—NH2末端氨基酸的标记和微量氨基酸的定量测定。;（2） 烃基化反应常用于蛋白质的N端氨基酸分析 A. 与二硝基氟苯的反应 B. 氨基酸与苯异硫氰酸（PITH）的反应 ;Sanger 反应?;Edman反应;（三）由氨基和羧基共同参加的反应;+;3、成肽反应;4. 离子交换反应;（四）? 侧链R基参加的反应(自学);光学性质;蛋白质在280nm有最大 光吸收，可用分光光度 法测定样品中蛋白质含量。;四、??基酸混合物的分析分离;（一）基于电荷性质差异的分离方法;2、?? 离子交换柱层析 P152 磺酸型阳离子交换树脂;氨基酸在树脂上结合的牢固程度取决于： 1.氨基酸与树脂上解离基团之间的静电引力。 2.氨基酸与树脂基质聚苯乙烯之间的疏水作用。;（二）基于分配系数（极性）差异的分离方法——分配层析