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基因工程应用预习提纲： 1.植物基因工程技术主要用于哪些方面? 2.虫害给农作物带来了哪些影响? 传统农业如何 防治害虫? 有哪些不足? 3. 抗虫基因有哪些？抗虫棉的目的基因是什么?目的基因从何而来?对哺乳动物有害吗？什么是病原微生物？有哪些种类？ 4.动物基因工程前景广阔？（重点) 5.乳腺生物反应器的优点?(重点) 6.基因工程药品包括? 7.基因治疗概念? 8.基因芯片? （二）、鉴定（个体生物学水平） 2、检测目的基因是否转录出了mRNA 3、检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 ①方法: 分 子 杂 交 方法: 抗原抗体杂交 ②过程: 用上述探针和转基因生物的mRNA杂交,若出现杂交带,表明目的基因转录出了mRNA 提取 （3）检测目的基因是否翻译成蛋白质 方法——抗原-抗体杂交 苏云金杆菌 Bt毒素蛋白 将Bt毒蛋白注射小鼠体内 从小鼠血管抽出血液分离出抗Bt毒素的抗体 抗体 蛋白质 出现杂交带 脱分化 组织培养 若不能表达，要对抗虫基因再进行修饰。 怎样检验抗虫基因在棉细胞内是否表达呢？ 没有抗虫基因 的棉植株 有抗虫基因的棉植株 棉铃虫 虫没有死 虫被杀死 没有表达 目的基因表达 提示： ①DNA分子杂交技术首先提取受体细胞中的DNA，然后高温解成单链，再与同位素标记的DNA探针杂交； ②抗原－抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋白质注射动物进行免疫，产生相应的抗体，并提取出而来的。 包括抗虫、抗病的接种实验，以确定是否有抗性以及抗性的程度； 基因工程产品与天然产品的活性比较，以确定功能是否相同等。 个体水平鉴定 是否成功显示出杂交带 抗原—抗体杂交 目的基因是否翻译出蛋白质 第三步 是否成功显示出杂交带 分子杂交技术 （DNA和mRNA之间） 目的基因是否转录出mRNA 第二步 是否成功显示出杂交带 DNA分子杂交 （DNA和DNA之间） 目的基因是否进入受体细胞 第一步 分子检测 结果显示 方法 检测内容 步骤 类型 目的基因的表达和检测 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法、 Ca2+处理 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定： 2、下列属于获取目的基因的方法的是( ) ①利用mRNA反转录形成 ②从基因组文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥ 1．在已知基因的核苷酸序列的情况下，获取目的基因的最方便方法是 　　A、化学合成法? ? B、基因组文库法 C、CDNA文库法?? D、聚合酶链反应 有关基因工程的叙述正确的是 （ ） A、限制酶只在获得目的基因时才用 B、重组质粒的形成在细胞内完成 C、质粒都可作为运载体 D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 D 有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制性内切酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶 A 目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定和检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是 ①检测受体细胞中是否有目的基因 ②检测受体细胞中是否有致病基因 ③检测目的基因是否转录出mRNA ④检测目的基因是否翻译出蛋白质 A．①②③ B．②③④ C．①③④ D．①②④ C 采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是 ①将毒素蛋白质注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵中 ④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，导人细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养 A．①② B．②③ C．③④ D．①④ C 练习1：(2008理综山东卷)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于