植物细胞工程的基本技术用资料文档.ppt

(1)在组织培养实验中，为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作？ 防止杂菌污染，因为杂菌生长快，会和培养物争夺营养。杂菌生长过程中会产生有害的物质，导致培养物迅速死亡。 合作学习 (2)在本实验中，切取胡萝卜块根时强调要切取含有形成层部分，原因是这部分容易诱导形成愈伤组织。请思考一下，胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花），是否也能培养成小植株，你能用实验的方法进行验证吗？ 胡萝卜的其他部分（如茎、叶、花）也能培养再生形成小植株，只是诱导愈伤组织比较困难。 依据学过的知识和实验过程思考回答： 2、决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么？ 植物激素的种类和比例 1、离体的器官、组织或细胞，如果不进行脱分化处理能否培养成完整的植物体？ 不能，因为细胞已经分化，失去了分裂能力。不进行脱分化处理就不能形成愈伤组织 生长素：细胞分裂素的比例 大于1----促进根形成 小于1-----促进芽的形成 等于1-----愈伤组织不分化 3、为什么诱导愈伤组织的过程中应避光培养？ 在有光时，往往容易形成维管组织，而不易形成愈伤组织。（但再分化时需要光，光能使细胞内形成叶绿体、叶绿素，进行光合作用） 应该掌握的几个概念： 1愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种a高度液泡化、b无定形状态薄壁细胞组成的c排列疏松无规则的组织。 2、植物细胞的脱分化： 由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤 组织的过程，又称去分化。 脱分化的实质和结果分别是什么？ 实质是恢复细胞的全能性过程。 结果是形成愈伤组织。 3、植物细胞的再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 小结： 植物组织培养的过程 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 再分化 （离体的,已分化组织或细胞） （未分化） （分化） 条件？ 优点？ 特点？ 繁殖速度快 不受季节限制 工厂化生产 幼苗无毒 保持优良性状 ①适宜温度、光照、 pH和无菌环境。 ②无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素等） 无定形状态 薄壁细胞 高度液泡化 排列疏松、无规则 无叶绿体,不进行光合作用 植物组织培养的概念： 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 二、植物体细胞杂交技术： 因为不同种生物之间存在着生殖隔离，所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。 于是，这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。 这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？ “Potamato” 1．你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合，遇到的第一个障碍是什么？ 2．有没有一种温和的去壁方法呢？ 3．为什么两个原生质体能发生融合，这与细胞膜的什么特性有关？ 4．如何将杂种细胞培育成杂种植株？ 请思考： 1、过程： 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法？ 促进融合的方法？ 融合完成的 标志 植物细胞B 植物体细胞杂交 去壁的常用方法： 酶解法（纤维素酶、果胶酶等） 原生质体融合方法： 物理法：离心、振动、电刺激等 化学法：聚乙二醇（PEG） 原生质体融合实质： 原生质体融合成功的标志： 2、概念： 将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 3、优势：（与有性杂交方法比较） 克服了不同种生物间的生殖隔离障碍 4、未解决的问题： 未能让杂种植物按照人们的需要 表现出亲代的优良。 白菜 甘蓝 白菜－甘蓝 “白菜－甘蓝”同普通白菜相比，具有生长期短、耐热性强和易于贮藏等优点。 为什么“番茄—马铃薯”超级杂种植株没有如科学家所想像的那样，地上长番茄、地下结马铃薯？ 主要原因是：生物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，所以马铃薯—番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达，杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。 自然界中有一种含有叶绿体的原生动物──眼虫，说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活,动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？如果理论上可行，请设计出具体实验方案。 异想天开 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 小结